Expansión in vitro de células madre hepáticas individuales Lgr5+ inducida por regeneración impulsada por Wnt

Área de la Ciencia:

• Hepatología y biología de células madre.
• Investigar los mecanismos de regeneración del hígado.

Sus antecedentes:

• El receptor acoplado a la proteína G 5 (Lgr5) rico en leucina y que contiene repeticiones, marca la división activa de las células madre en varios tejidos autorrenovables.
• Un sistema de cultivo 3D permite la expansión clonal de Lgr5(+) células madre en organoides.
• RSPO1 es un agonista y ligando Wnt crucial para LGR5, esencial para el cultivo de organoides.

Objetivo del estudio:

• Para investigar la presencia y la función de las células madre Lgr5(+) en el hígado adulto, especialmente después de un daño.
• Para explorar el potencial de estas células para regenerar el tejido hepático.

Principales métodos:

• Utilizado análisis de expresión Lgr5-lacZ en hígado de ratón adulto sano y dañado.
• Trazado de linaje de ratón empleado con un nuevo alelo knock-in Lgr5-IRES-creERT2.
• Expansión clonal establecida a largo plazo de células individuales Lgr5(+) en organoides hepáticos en medio que contiene RSPO1.
• Diferenciación inducida de organoides in vitro y evaluación de la generación de hepatocitos tras el trasplante en ratones Fah.

Principales resultados:

• Lgr5-lacZ no se detectó en el hígado adulto sano, pero apareció en las células cercanas a los conductos biliares tras el daño, en correlación con la activación de la señalización Wnt.
• Se demostró que las células Lgr5(+) inducidas por el daño generan hepatocitos y conductos biliares in vivo.
• Las células individuales Lgr5(+) de hígado dañado podrían expandirse clonalmente en organoides estables.
• Estos organoides podrían diferenciarse en hepatocitos funcionales después del trasplante.

Conclusiones:

• Las células madre Lgr5(+) están presentes en el hígado adulto y se activan en caso de daño.
• Estas células sirven como fuente para la regeneración de los hepatocitos y los conductos biliares.
• Las células madre hepáticas, similares a las de otros tejidos auto-renovables, pueden ser cultivadas y diferenciadas, avanzando en la investigación de reparación hepática.