La fosforilación de Dishevelled por la proteína quinasa RIPK4 regula la señalización de Wnt

Área de la Ciencia:

• Las vías de señalización celular.
• Biología molecular La biología molecular.
• Biología del desarrollo Biología del desarrollo.

Sus antecedentes:

• La proteína quinasa 4 que interactúa con los receptores (RIPK4) es crucial para la diferenciación epidérmica y está implicada en el síndrome de Bartsocas-Papas.
• Se conoce la interacción de RIPK4 con la proteína quinasa C, pero sus mecanismos de señalización precisos siguen siendo en gran medida no aclarados.
• Comprender el papel de RIPK4 en la señalización es vital para comprender el desarrollo epidérmico y los trastornos genéticos relacionados.

Objetivo del estudio:

• Investigar los mecanismos de señalización de la proteína quinasa 4 (RIPK4) que interactúa con los receptores.
• Para determinar el papel de RIPK4 en las vías de señalización de Wnt.
• Explorar las implicaciones de la función y las mutaciones de RIPK4 tanto en el desarrollo como en la enfermedad.

Principales métodos:

• Expresión ectópica del tipo salvaje y mutante RIPK4 en cultivo celular.
• Análisis de la acumulación citosólica de beta-catenina y cambios transcripcionales aguas abajo.
• Experimentos en embriones de Xenopus usando morfolinos Ripk4 y coexpresión con Xwnt8.
• Los ensayos de coinmunoprecipitación identifican a los socios que interactúan con RIPK4.
• Evaluación del efecto de RIPK4 en el crecimiento de células tumorales dependientes de Wnt en modelos de xenotransplante.

Principales resultados:

• RIPK4 ectópico, pero no formas inactivas o mutantes, indujo la acumulación de beta-catenina y un programa transcripcional similar al de Wnt.
• En Xenopus, Ripk4 mejoró la señalización de Wnt, mientras que la inhibición de Ripk4 o los mutantes inactivos la antagonizaron.
• RIPK4 interactuó de manera constitutiva con DVL2 y, tras la estimulación de Wnt3a, con LRP6.
• La fosforilación mediada por RIPK4 de DVL2 promovió la señalización Wnt canónica.
• El knockdown de RIPK4 suprimió el crecimiento dependiente de Wnt de xenografts de tumores humanos.

Conclusiones:

• RIPK4 actúa como un regulador positivo de la señalización canónica de Wnt, influyendo en la estabilidad de la beta-catenina y la expresión génica aguas abajo.
• La interacción de RIPK4 con DVL2 y LRP6 es crítica para su papel en la activación de la vía Wnt.
• La actividad anormal o la sobreexpresión de RIPK4 puede contribuir a la patogénesis de ciertos cánceres al promover el crecimiento dependiente de Wnt.