Identificación de un intermedio funcional en la activación del receptor en la transcripción libre celular dependiente...

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Endocrinología Endocrinología.
• Regulación genética Reglamento genético.

Sus antecedentes:

• La progesterona mejora la transcripción a través de los elementos de respuesta de la progesterona (PREs).
• El receptor de progesterona (PR) modula la transcripción mediante la formación de complejos de preiniciación.
• El papel del ligando en la activación transcripcional mediada por PR no se entiende completamente.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un sistema in vitro que imite la activación transcripcional dependiente de las hormonas in vivo.
• Para diseccionar el papel específico del ligando esteroide en la regulación génica por la progesterona.

Principales métodos:

• Reconstitución de la síntesis de ARN dependiente de progesterona in vitro utilizando extractos nucleares de las células T47D.
• Análisis del receptor de progesterona (PR) que se une a los PREs y su dependencia de la hormona.
• Investigación del estado PR (forma 4S, disociación hsp90) en relación con la actividad transcripcional.

Principales resultados:

• Reconstituyó con éxito la transcripción dependiente de progesterona in vitro a partir de un promotor impulsado por PRE.
• La activación transcripcional fue desencadenada por la unión de PR inducida por hormonas a PREs, mostrando especificidad hormonal.
• Se requería hormona para la unión y activación del ADN, incluso cuando la PR estaba en una forma 4S disociada de hsp90.0.

Conclusiones:

• La transactivación mediada por ligandos implica una PR inducida por hormonas que se une al ADN.
• La disociación de hsp90 y la formación de un intermediario 4S puede preceder a la activación final de la expresión génica mediada por ligandos.