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Updated: May 13, 2026
Measuring Phagosome pH by Ratiometric Fluorescence Microscopy
Published on: December 7, 2015
Detección de pH intracelular de rango completo mediante un fluorógeno ratiométrico de dos canales de emisión activa
Sijie Chen1, Yuning Hong, Yang Liu
1Division of Biomedical Engineering, Department of Chemistry, Institute for Advanced Study, and Institute of Molecular Functional Materials, The Hong Kong University of Science & Technology (HKUST), Clear Water Bay, Kowloon, Hong Kong, China.
Los investigadores desarrollaron un nuevo tinte sensible al pH, TPE-Cy, para imágenes de células vivas. Esta sonda biocompatible rastrea con precisión los cambios de pH intracelular, visualizando los compartimentos celulares ácidos y básicos con fluorescencia roja y azul distintas.
Área de la Ciencia:
- La bioquímica es la bioquímica.
- Biología celular Biología celular.
- Biología Química Biología química.
Sus antecedentes:
- El pH intracelular (pHi) es crucial para las funciones celulares y los estados de enfermedad.
- La detección precisa de pHi en células vivas es un desafío debido a las limitaciones de las sondas actuales.
Objetivo del estudio:
- Desarrollar y caracterizar un fluorógeno novedoso, sensible y permeable a las células para la detección y el monitoreo del pH intracelular (pHi).
- Para demostrar la utilidad de la sonda desarrollada para visualizar y cuantificar las variaciones de pHi dentro de las células vivas.
Principales métodos:
- Síntesis y caracterización de un adducto de tetrafenileteno-cianina (TPE-Cy) como un fluorógeno sensible al pH.
- Evaluación de la biocompatibilidad de TPE-Cy, la permeabilidad celular y la respuesta de fluorescencia dependiente del pH.
- Aplicación de TPE-Cy para imágenes de pHi en células vivas utilizando microscopía confocal y análisis ratiométrico, complementado por citometría de flujo.
Principales resultados:
- TPE-Cy exhibe una excelente biocompatibilidad y permeabilidad celular, entrando fácilmente en las células vivas.
- La sonda muestra respuestas sensibles y ratiométricas al pHi en todo el rango fisiológico, emitiendo fluorescencia roja en condiciones ácidas y azul en condiciones básicas.
- La microscopía confocal y la citometría de flujo confirmaron la capacidad de TPE-Cy para obtener imágenes pHi precisas y monitorear los compartimentos celulares.
Conclusiones:
- TPE-Cy es una sonda fluorescente robusta y efectiva para la detección e imagen del pH intracelular en tiempo real.
- La naturaleza ratiométrica de TPE-Cy proporciona un indicador confiable de la concentración local de protones dentro de las células vivas.
- Esta nueva herramienta facilita avances en la comprensión de la fisiología celular y la patología relacionada con la dinámica pHi.
