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Updated: May 6, 2026
08:27
Highly Sensitive and Rapid Fluorescence Detection with a Portable FRET Analyzer
Published on: October 1, 2016
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Nuevo ensayo fluorométrico continuo para la transglicosilasa bacteriana utilizando la transferencia de energía de
Shih-Hsien Huang1, Wei-Shen Wu, Lin-Ya Huang
1Genomics Research Center, Academia Sinica , 128 Academia Road, Section 2, Nankang, Taipei, 115, Taiwan.
Journal of the American Chemical Society
|October 18, 2013
Resumen
Los científicos desarrollaron un nuevo ensayo fluorescente para encontrar nuevos antibióticos dirigidos a la transglicosilasa bacteriana (TGase). Este ensayo permite una selección eficiente de potenciales inhibidores de la TGasa para el descubrimiento de fármacos.
Área de la Ciencia:
- La bioquímica es la bioquímica.
- Microbiología Microbiología.
- Descubrimiento de Drogas Descubrimiento de Drogas
Sus antecedentes:
- La resistencia a los antibióticos requiere nuevos agentes terapéuticos.
- La transglicosilasa (TGase) es una enzima bacteriana crucial en la síntesis de peptidoglicanos y un objetivo farmacológico atractivo.
- Los inhibidores de la TGasa existentes no han progresado hacia el uso clínico, en parte debido a las limitaciones de los ensayos.
Objetivo del estudio:
- Desarrollar un ensayo continuo, cuantitativo y de alto rendimiento para la transglicosilasa bacteriana (TGase).
- Para investigar la especificidad y la afinidad del sustrato de TGasa utilizando nuevos análogos de lípidos II.
- Para identificar potentes inhibidores de la TGasa para el desarrollo de antibióticos.
Principales métodos:
- Se diseñó un ensayo fluorescente continuo basado en la transferencia de energía de resonancia Förster (FRET).
- Se sintetizaron análogos de lípidos II con un extintor y un fluoróforo.
- El ensayo se utilizó para determinar la especificidad del sustrato, la afinidad y las constantes de inhibición.
- Se realizó un cribado de alto rendimiento de una gran biblioteca compuesta.
Principales resultados:
- El nuevo ensayo FRET monitorea con éxito la actividad de las TGases.
- Se caracterizó la especificidad del sustrato y la afinidad de varios análogos de lípidos II.
- Se determinaron las constantes de inhibición para los inhibidores conocidos de la TGasa.
- Una pantalla de alto rendimiento identificó potentes inhibidores de la TGasa de 120.000 compuestos.
Conclusiones:
- El ensayo fluorescente desarrollado es eficiente y conveniente para el estudio de TGase.
- Este ensayo facilita el cribado de alto rendimiento para el descubrimiento de nuevos antibióticos dirigidos a TGase.
- Los hallazgos allanan el camino para el desarrollo de nuevos antibióticos contra las bacterias resistentes.
