Clonado molecular del receptor de progesterona del pollo

Área de la Ciencia:

• Biología molecular La biología molecular.
• Endocrinología Endocrinología.
• Genética La genética.

Sus antecedentes:

• El receptor de progesterona (PR) es un receptor nuclear clave que regula la expresión génica.
• Comprender los dominios funcionales de la PR es esencial para aclarar su papel en los procesos celulares.

Objetivo del estudio:

• Para aislar clones de ADN complementario (ADNc) que codifican el receptor de progesterona de pollo.
• Para definir los dominios funcionales del receptor de progesterona involucrado en la regulación génica.

Principales métodos:

• Aislamiento de clones de ADNc de un oviducto de pollo lambda gt11 biblioteca de expresión.
• Cribado de clones positivos utilizando anticuerpos monospecíficos contra el receptor de progesterona.
• Microsecuenciación del receptor de progesterona purificado para obtener secuencias de péptidos.
• Análisis de secuencias de nucleótidos de clones de ADNc para deducir secuencias de aminoácidos.
• Análisis de manchas del norte para detectar especies de ARN mensajero (ARNm).

Principales resultados:

• Se aislaron con éxito clones de ADNc que codifican el receptor de progesterona de pollo.
• Identificó una secuencia de péptido de 36 aminoácidos dentro de la clona de ADNc más larga.
• La secuencia de aminoácidos deducida reveló una región rica en cisteína homóloga a otros receptores de esteroides y proteínas virales.
• El análisis de la mancha del norte indicó al menos tres especies distintas de ARNm para el receptor de progesterona.
• Estas especies de ARNm se encontraron exclusivamente en el oviducto y eran inducibles por los estrógenos.

Conclusiones:

• Los clones de ADNc aislados proporcionan una herramienta para estudiar el receptor de progesterona del pollo.
• La región rica en cisteína identificada es probablemente un dominio funcional crítico para la actividad del receptor de progesterona.
• La existencia de múltiples especies de ARNm sugiere una compleja regulación de la expresión de los receptores de progesterona.
• La inducción de estrógeno del ARNm del receptor de progesterona pone de relieve la interacción entre estas vías hormonales.