SELMA de alta temperatura: evolución de grupos de oligomannosa soportados por ADN que son fuertemente reconocidos por...

Área de la Ciencia:

• Química de los carbohidratos Química de los carbohidratos
• Inmunología Inmunología.
• Biotecnología La biotecnología es la biotecnología.

Sus antecedentes:

• Los métodos de evolución dirigida como SELMA optimizan los grupos de carbohidratos soportados por ADN para el reconocimiento de lectina.
• Las aplicaciones anteriores de SELMA produjeron glicanos de oligomanosa reconocidos por el anticuerpo 2G12 del VIH con afinidad moderada.
• El anticuerpo 2G12 del VIH se dirige a los epítopos conservados en la proteína del sobre del VIH gp120.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un método SELMA modificado para mejorar el diseño de los glucoclusters.
• Para crear nuevos glucoclusters con una afinidad de unión significativamente mejorada y una densidad de glicano reducida.
• Investigar el potencial de estos glucoclusters optimizados como inmunógenos para la obtención de anticuerpos ampliamente neutralizantes contra el VIH.

Principales métodos:

• Modificación de la SELección con Aptameros Modificados (técnica SELMA).
• Síntesis de glicoclusters soportados por ADN con un número variable de glicanos de oligomannosa.
• Mediciones de afinidad (Kd) utilizando resonancia plasmónica de superficie o técnicas similares para cuantificar las interacciones anticuerpo-glicano.
• Evaluación del reconocimiento de los glucoclusters por el anticuerpo de neutralización amplia del VIH 2G12.

Principales resultados:

• El método SELMA modificado produjo glicómeros con un reconocimiento del objetivo 100 veces mayor en comparación con los métodos anteriores.
• Estos nuevos glicoglomeros requerían significativamente menos glicanos (3-4 unidades) para una fuerte unión.
• Los glicoclusters demostraron bajas constantes de disociación nanomolar (Kd tan bajo como 1.7 nM) con el anticuerpo 2G12 del VIH.
• La afinidad de unión lograda por los glucoclusters optimizados coincidía con la de la proteína nativa de la envoltura del VIH gp120.

Conclusiones:

• El enfoque SELMA modificado permite la creación de glicósteres altamente potentes con componentes mínimos de glicano.
• Estos glucoclusters optimizados representan un avance significativo en la orientación del anticuerpo 2G12 del VIH.
• Los glucoclusters desarrollados son candidatos prometedores para su uso como inmunógenos para inducir anticuerpos contra el VIH ampliamente neutralizantes.