Las estructuras de las endonucleasas Cas9 revelan la activación conformacional mediada por ARN

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• La bioquímica es la bioquímica.
• Genética La genética.

Sus antecedentes:

• Los sistemas CRISPR-Cas9 proporcionan inmunidad adaptativa bacteriana a través de la escisión del ADN guiada por ARN.
• Cas9 es una herramienta versátil para la edición y regulación del genoma en eucariotas.

Objetivo del estudio:

• Para aclarar las bases estructurales de la función y activación de Cas9.
• Para revelar el núcleo estructural compartido de los subtipos de la enzima Cas9.

Principales métodos:

• Cristalografía de rayos X con una resolución de 2,6 y 2,2 angstroms.
• Reconstrucciones de microscopía electrónica de una sola partícula.

Principales resultados:

• Se determinaron las estructuras cristalinas de dos subtipos principales de Cas9, revelando un núcleo estructural conservado.
• Identificó grietas de unión de ácido nucleico dentro de las arquitecturas Cas9.
• Se observó una reorientación inducida por ARN guía de los lóbulos de Cas9 para formar un canal de unión al ADN.

Conclusiones:

• La carga de ARN guía es un paso crítico en la activación de Cas9.
• Los reordenamientos estructurales preceden a la unión del ADN objetivo, lo que facilita la formación de canales.