Reactivación de la expresión génica de la tiroglobulina en las células tiroideas transformadas por 5-azacitidina

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Biología celular Biología celular.
• Investigación de Investigación del Cáncer.

Sus antecedentes:

• Las células tiroideas transformadas de rata muestran una expresión suprimida de tiroglobulina (Tg).
• Las células transformadas por el virus del sarcoma murino de Kirsten pierden el fenotipo de transformación a temperaturas no permisivas, pero el promotor Tg permanece inactivo.

Objetivo del estudio:

• Investigar los mecanismos subyacentes al silenciamiento del promotor de tiroglobulina en las células transformadas en Ras.
• Explorar el papel de la metilación del ADN y los factores de transcripción en la regulación del gen Tg.

Principales métodos:

• Utilizó un alelo Ras sensible a la temperatura en células tiroideas de rata transformadas.
• Ensayos genéticos de reporteros empleados (resistencia al promotor Tg-neomicina) para evaluar la actividad del promotor.
• Se administró el agente desmetilador del ADN 5-azacitidina.
• Se ha detectado el factor nuclear TgTF1 específico de la tiroides utilizando técnicas moleculares.

Principales resultados:

• El promotor de la tiroglobulina permaneció inactivo en las células transformadas incluso después de la reversión fenotípica.
• El tratamiento con 5-azacitidina reactivó el promotor de Tg y confirió resistencia a G418.
• La actividad del promotor de Tg se correlaciona con la presencia de TgTF1.
• TgTF1 era indetectable en las células transformadas, pero reapareció después del tratamiento con 5-azacitidina.
• La restauración de la actividad Ras condujo a una rápida pérdida de la resistencia a TgTF1 y G418.

Conclusiones:

• La transformación Ras induce el silenciamiento epigenético del promotor de la tiroglobulina.
• La desmetilación del ADN y la restauración de TgTF1 son cruciales para reactivar el promotor de Tg.
• La señalización Ras regula negativamente la expresión de TgTF1, contribuyendo a la desdiferenciación de la tiroides.