Fenotipización de una sola célula dentro de un tejido transparente e intacto a través de la limpieza de todo el...

Área de la Ciencia:

• La neurociencia es la neurociencia.
• Biotecnología La biotecnología es la biotecnología.
• Imágenes anatómicas de imágenes.

Sus antecedentes:

• Los mapas anatómicos y fenotípicos 3D son cruciales para comprender las relaciones estructura-función a través de escalas.
• Existe una importante brecha de conocimiento debido a la falta de métodos de imágenes de órganos completos.
• Las limitaciones actuales dificultan el mapeo integral de las estructuras celulares y la conectividad dentro de los órganos.

Objetivo del estudio:

• Presentar nuevas técnicas para la limpieza e imágenes de órganos enteros y tejidos de todo el cuerpo.
• Para permitir el mapeo de alta resolución y alto contenido y el fenotipo de estructuras biológicas.
• Para abordar la ausencia de métodos para crear mapas anatómicos detallados en 3D de órganos intactos.

Principales métodos:

• Técnica de Claridad Pasiva (PACT) para la limpieza pasiva de tejidos e inmunostainado de órganos intactos.
• Solución de coincidencia del índice de refracción (RIMS) como medio de montaje para imágenes de tejidos gruesos.
• La liberación in situ de agentes asistida por perfusión (PARS) para la limpieza de todo el cuerpo y el etiquetado inmunológico.

Principales resultados:

• PACT, RIMS y PARS hacen que órganos y cuerpos enteros sean macromolecularmente permeables y ópticamente transparentes.
• Los métodos son compatibles con la fluorescencia endógena, la inmunohistoquímica y la molécula única de ARN FISH en roedores.
• Imágenes de resolución celular y subcelular demostradas con capacidades de almacenamiento a largo plazo.

Conclusiones:

• Las técnicas desarrolladas superan las limitaciones en la obtención de imágenes de órganos completos, permitiendo un mapeo anatómico 3D detallado.
• Estos métodos facilitan la fenotipización de alta resolución y alto contenido de elementos normales y patológicos dentro de sistemas biológicos intactos.
• Los protocolos PACT, RIMS y PARS ofrecen un conjunto de herramientas versátiles para el avance de la investigación biológica y médica a través de capacidades de imagen mejoradas.