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La especificidad de unión al ADN cognado se mantuvo después del intercambio de cremallera de leucina entre GCN4 y
P Agre1, P F Johnson, S L McKnight
1Howard Hughes Research Laboratories, Department of Embryology, Carnegie Institution of Washington, Baltimore, MD 21210.
Resumen
La región básica de las proteínas de unión al ADN C/EBP y GCN4 determina su especificidad de unión al ADN. El intercambio de estas regiones básicas entre las proteínas C/EBP y GCN4 confirmó que la región básica dicta qué secuencias de ADN se reconocen.
Área de la Ciencia:
- Biología Molecular Biología Molecular
- Genética La genética.
- La bioquímica es la bioquímica.
Sus antecedentes:
- C/EBP y GCN4 son proteínas de unión al ADN específicas de la secuencia que regulan la expresión génica.
- C/EBP controla los genes en el metabolismo de los lípidos y los carbohidratos, uniéndose a 5'-ATTGCGCAAT-3'.
- GCN4 regula los genes de la biosíntesis de aminoácidos en la levadura, uniéndose a 5'-ATGA(G/C) TCAT-3'.
Objetivo del estudio:
- Investigar el papel de la "región de base" en la determinación de la especificidad de unión al ADN para C/EBP y GCN4.
- Para probar la hipótesis de que la región básica, no la cremallera de leucina, confiere especificidad de unión al ADN.
Principales métodos:
- Intercambio recíproco de las regiones básicas y las cremalleras de leucina entre las proteínas C/EBP y GCN4.
- Creación de proteínas recombinantes para analizar las propiedades de unión al ADN.
Principales resultados:
- Se encontró que la especificidad de unión al ADN en ambas proteínas recombinantes se correlacionaba con el origen de la región básica.
- La cremallera de leucina no confería especificidad de unión al ADN en las proteínas intercambiadas.
Conclusiones:
- La región básica del motivo bipartito de unión al ADN es el principal determinante del reconocimiento de la secuencia de ADN para C/EBP y GCN4.
- Este hallazgo aclara el mecanismo de unión al ADN específico de la secuencia por estos importantes reguladores transcripcionales.