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Mecanismos para regular la expresión de las isoformas de membrana de Fc gamma RIII (CD16)
M L Hibbs1, P Selvaraj, O Carpén
1Department of Pathology, Harvard Medical School, Boston, MA 02115.
Science (New York, N.Y.)
|December 22, 1989
Resumen
Los receptores Fc (CD16) en los granulocitos y las células NK utilizan diferentes anclas de membrana. Un residuo de serina específico regula el anclaje, con la secuencia CD16 siendo dominante sobre la expresión de la subunidad gamma para el reanclaje del glicano de fosfatidilinositol.
Área de la Ciencia:
- Inmunología Inmunología.
- Biología Molecular Biología Molecular
- Biología celular Biología celular.
Sus antecedentes:
- Los receptores Fc de las células granulocíticas y de las células asesinas naturales (NK) para la inmunoglobulina G (CD16) comparten una alta homología de secuencia, pero difieren en los tipos de anclaje de membrana.
- Las isoformas CD16 utilizan distintos mecanismos de anclaje en la membrana: el fosfatidilinositol glicano (PIG) para los granulocitos y el polipéptido para las células NK.
Objetivo del estudio:
- Para investigar los determinantes moleculares que regulan el anclaje de la membrana diferencial de las isoformas CD16.
- Para aclarar el papel de residuos específicos de aminoácidos y subunidades accesorias en la localización de la membrana del receptor Fc.
Principales métodos:
- Mutagenesis dirigida al sitio de las isoformas de CD16 para alterar las secuencias de aminoácidos, particularmente cerca del sitio de fijación del ancla.
- Estudios de expresión en células COS, incluida la co-transfección con la subunidad gamma del receptor IgE Fc de alta afinidad (Fc epsilon RI).
- Análisis del tipo de anclaje de membrana y la expresión superficial de las variantes CD16 diseñadas.
Principales resultados:
- Un residuo de serina cerca del sitio de anclaje del PIG en el dominio extracelular fue identificado como crítico para regular el anclaje.
- La isoforma CD16 de la célula NK requirió co-transfección con la subunidad gamma para la expresión superficial en las células COS.
- Se encontró que la secuencia CD16 intrínseca, en lugar de la expresión de la subunidad gamma, era dominante en la determinación del reanclaje de PIG.
Conclusiones:
- La secuencia específica de aminoácidos de las isoformas CD16 dicta su mecanismo de anclaje en la membrana.
- Un solo residuo de serina juega un papel clave en la regulación del cambio entre los anclajes de PIG y polipéptido.
- Si bien la subunidad gamma es necesaria para la expresión superficial de la célula NK CD16, la propia secuencia CD16 rige el tipo de anclaje de membrana utilizado.