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Updated: Mar 12, 2026
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Expanding the Comprehension of the Tumor Microenvironment using Mass Spectrometry Imaging of Formalin-Fixed and Paraffin-Embedded Tissue Samples
Published on: June 29, 2022
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iDISCO: un método simple y rápido para inmunomarcar muestras de tejidos grandes para imágenes de volumen.
Nicolas Renier1, Zhuhao Wu1, David J Simon1
1Laboratory of Brain Development and Repair, The Rockefeller University, 1230 York Avenue, New York, NY 10065, USA.
Cell
|November 24, 2014
Resumen
Desarrollamos iDISCO, un método rápido y asequible para la obtención de imágenes en 3D de órganos enteros y embriones. Esta técnica permite la visualización detallada de las estructuras moleculares dentro de los tejidos grandes y limpiados, ayudando a la investigación en neurobiología.
Área de la Ciencia:
- La neurociencia es la neurociencia.
- Biología Molecular Biología Molecular
- Biotecnología La biotecnología es la biotecnología.
Sus antecedentes:
- La visualización 3D de estructuras molecularmente etiquetadas en tejidos grandes es un desafío.
- Los métodos existentes a menudo son complejos, requieren mucho tiempo o son costosos.
Objetivo del estudio:
- Introducir iDISCO, un método sencillo, rápido y barato para el inmunolabelamiento de montaje completo y imágenes volumétricas en 3D de muestras biológicas grandes y limpiadas.
- Demostrar la compatibilidad de iDISCO con varios anticuerpos y reporteros transgénicos.
- Aplicar iDISCO para el análisis de la degeneración neuronal en tejidos complejos.
Principales métodos:
- Protocolo iDISCO para el etiquetado inmunológico completo y la limpieza de tejidos.
- Imágenes volumétricas de muestras eliminadas (embriones perinatales de ratón, órganos adultos como el cerebro y los riñones).
- Pruebas de compatibilidad con 28 anticuerpos y reporteros de proteína verde fluorescente (GFP).
Principales resultados:
- iDISCO ha permitido con éxito la inmuneetiquetación de montaje completo y la imagen de volumen en 3D de diversos tejidos grandes.
- El método mostró compatibilidad con una amplia gama de anticuerpos, incluidos los dirigidos a antígenos endógenos y reporteros transgénicos.
- La aplicación a neuronas degeneradas reveló una variabilidad inesperada en el número de neuronas apoptóticas y permitió la visualización de axones degenerados individuales y Caspase-3 escindida in vivo.
Conclusiones:
- iDISCO es una técnica efectiva y accesible para la imagen 3D de estructuras inmunolabeladas en tejidos complejos.
- El método facilita el estudio de las estructuras celulares y subcelulares en órganos y embriones intactos.
- iDISCO proporciona nuevos conocimientos sobre los procesos de degeneración neuronal.
