Una mutación de hiperrecombinación en S. cerevisiae identifica una nueva topoisomerasa eucariota

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Genética La genética.
• La bioquímica es la bioquímica.

Sus antecedentes:

• Se identificó una mutación de hiperrecombinación en Saccharomyces cerevisiae (levadura).
• Esta mutación aumenta la frecuencia de recombinación alrededor del gen SUP4-omicron.
• La mutación también causó un fenotipo de crecimiento lento.

Objetivo del estudio:

• Clonar y caracterizar el gen responsable de la hiperrecombinación y los fenotipos de crecimiento lento.
• Para determinar si este gen representa una nueva topoisomerasa eucariota.

Principales métodos:

• La clonación por complementación del fenotipo de crecimiento lento.
• Secuenciación del ADN del gen clonado.
• Construcción de mutantes dobles con genes conocidos de topoisomerasa de levadura.
• Prueba de complementación funcional utilizando topoisomerasa I. bacteriana.

Principales resultados:

• El gen clonado codifica una proteína de 656 aminoácidos homóloga a la topoisomerasa bacteriana de tipo I.
• No se encontró homología con las topoisomerasas eucariotas conocidas.
• Los mutantes dobles exhibieron defectos de crecimiento sinérgicos, lo que sugiere funciones superpuestas.
• La topoisomerasa bacteriana de tipo I complementó el defecto de crecimiento de la mutación nula de la levadura.

Conclusiones:

• El locus TOP3 define un nuevo gen de topoisomerasa eucariota.
• Esta nueva topoisomerasa probablemente tiene funciones que se superponen con otras topoisomerasas de levadura conocidas.
• TOP3 es esencial para el crecimiento celular normal y juega un papel en la regulación de la recombinación.