Las respuestas al estrés. Las mutaciones en un factor de iniciación de la traducción identifican el objetivo de un...

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Biología celular Biología celular.
• La neurociencia es la neurociencia.

Sus antecedentes:

• La respuesta integrada al estrés (ISR) regula los procesos celulares críticos que incluyen la traducción, la inmunidad y la memoria.
• El inhibidor ISR ISRIB ha demostrado potencial para mejorar la función cognitiva y modular la respuesta de la proteína desplegada (UPR).

Objetivo del estudio:

• Para aclarar los mecanismos moleculares subyacentes a la acción de ISRIB en el ISR.
• Para identificar componentes celulares específicos dirigidos por el ISRIB.

Principales métodos:

• Cribado de células de mamíferos en cultivo en busca de mutaciones somáticas que confieran resistencia a ISRIB.
• Utilizando la edición de genes CRISPR-Cas9 para reintroducir mutaciones identificadas en células de tipo salvaje.
• Ensayos bioquímicos in vitro para evaluar la actividad del factor de intercambio de nucleótidos de guanina eIF2B y su sustrato eIF2.

Principales resultados:

• Se identificaron mutaciones de sentido erróneo agrupadas en la porción amino-terminal de la subunidad delta del factor de intercambio de nucleótidos de guanina (GEF) eIF2B.
• La reintroducción de estas mutaciones a través de CRISPR-Cas9 revirtió la inhibición de la ISR por parte de ISRIB.
• Las mutaciones también invirtieron el efecto estimulante de ISRIB en la actividad de eIF2B GEF hacia eIF2 in vitro.

Conclusiones:

• ISRIB se dirige directamente a una interacción entre el factor de iniciación de la traducción eIF2 y el GEF eIF2B.
• Esta interacción es fundamental para la regulación de la respuesta integrada al estrés.
• Los hallazgos proporcionan una base mecanicista para los efectos de ISRIB en los procesos celulares y la función cognitiva.