El Xist lncRNA interactúa directamente con SHARP para silenciar la transcripción a través de HDAC3

Área de la Ciencia:

• La epigenética es la epigenética.
• Biología Molecular Biología Molecular
• Genética La genética.

Sus antecedentes:

• Los ARN largos no codificantes (ARNlnc) regulan la expresión génica a través de diversos mecanismos.
• El Xist lncRNA inicia la inactivación del cromosoma X en las hembras de mamíferos, pero sus interactores de proteínas siguen siendo en gran medida desconocidos.
• Los métodos actuales son insuficientes para identificar exhaustivamente las proteínas que interactúan directamente con los lncRNAs.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un método para purificar los lncRNAs e identificar las proteínas que interactúan directamente.
• Para dilucidar la red de interacción de proteínas de Xist y su papel en el silenciamiento transcripcional.

Principales métodos:

• Desarrollo de una técnica de purificación de lncRNA.
• Espectrometría de masas cuantitativa para identificar las proteínas que interactúan con Xist.
• Ensayos funcionales para determinar el papel de las proteínas identificadas en el silenciamiento mediado por Xist.

Principales resultados:

• Se identificaron diez proteínas que se asocian específicamente con Xist.
• Se encontró que SHARP, SAF-A y LBR eran esenciales para el silenciamiento transcripcional mediado por Xist.
• Se requieren SHARP, SMRT y HDAC3 para la exclusión de la ARN polimerasa II y el reclutamiento del Complejo Represivo Polycomb 2 en el cromosoma X inactivo.

Conclusiones:

• Xist silencia la transcripción al interactuar directamente con SHARP, reclutar SMRT y activar HDAC3.
• La desacetilación de la histona por HDAC3 es crítica para excluir la ARN polimerasa II y establecer la inactivación del cromosoma X.
• Las proteínas identificadas proporcionan información clave sobre los mecanismos moleculares de la función de Xist.