Estructura de la proteína L del virus de la estomatitis vesicular obtenida por criomicroscopía electrónica

Área de la Ciencia:

• Virología Virología.
• Biología Estructural Biología estructural.
• Biología Molecular Biología Molecular

Sus antecedentes:

• Los virus de ARN de cadena negativa no segmentados (por ejemplo, Ébola, rabia) poseen proteínas grandes (L) cruciales para la replicación viral.
• La proteína L orquesta la polimerización del ARN dependiente del ARN, el encapsulamiento, la metilación y la poliadenilación.
• Comprender la estructura de la proteína L es clave para descifrar los mecanismos de síntesis del ARN viral.

Objetivo del estudio:

• Para determinar la estructura de alta resolución del virus de la estomatitis vesicular (VSV) proteína L.
• Para aclarar la base estructural de las múltiples actividades enzimáticas de la proteína L.
• Proporcionar información sobre el mecanismo de síntesis del ARN viral.

Principales métodos:

• Se empleó la criomicroscopia electrónica (cryo-EM) para visualizar la proteína VSV L.
• Se generó un mapa de densidad de alta resolución (3,8 Å).
• Se construyó un modelo atómico de la cadena polipeptídica de 2109 residuos.

Principales resultados:

• El modelo atómico revela tres dominios enzimáticos: la ARN polimerasa dependiente del ARN (RdRp), la poliribonucleotidil transferasa (PRNTasa) y la metiltransferasa.
• También se identificaron dos dominios estructurales.
• El dominio RdRp comparte similitudes estructurales con el virus dsRNA y las polimerasas del virus de la influenza.
• Se observó que un bucle del dominio de la PRNTasa interactúa con el sitio catalítico de RdRp, actuando potencialmente como un bucle de iniciación.

Conclusiones:

• La estructura determinada proporciona una comprensión a nivel atómico de la proteína VSV L.
• La interacción entre el bucle de la PRNTasa y el sitio catalítico de RdRp sugiere un mecanismo para acoplar la síntesis de ARN y los cambios conformacionales.
• Esta información estructural es vital para comprender la replicación de los virus de ARN de cadena negativa.