Las dinámicas conformacionales mediadas por cofactores promueven la liberación de productos de la dihidrofolato...

Área de la Ciencia:

• Enzimología Enzimología.
• La bioquímica es la bioquímica.
• Dinámica de las proteínas Dinámica de las proteínas.

Sus antecedentes:

• La dihidrofolato reductasa (DHFR) es crucial para la catálisis, con su dinámica vinculada a la función enzimática.
• La dinámica de las proteínas modula el paisaje conformacional durante el ciclo cinético del DHFR.
• La liberación del producto es el paso que limita la velocidad en la catálisis de DHFR.

Objetivo del estudio:

• Describir cuantitativamente la relación entre las fluctuaciones de las proteínas y la liberación del producto en DHFR.
• Investigar los mecanismos de las vías de liberación del producto.
• Para analizar el impacto de la mutación Leu28Phe (L28F) en la dinámica de la DHFR y la liberación del producto.

Principales métodos:

• Mediciones de dispersión de relajación de RMN para estudiar los movimientos en una escala de tiempo de milisegundos.
• Espectroscopia de flujo detenido para medir las tasas de disociación del tetrahidrofolato (THF).
• Análisis de los complejos DHFR de tipo silvestre y mutantes L28F.

Principales resultados:

• El intercambio conformal ocurre entre un estado de tierra oculto y un estado cerrado de baja población.
• La liberación del producto se produce a través de una vía intrínseca (espontánea) y una vía alostérica (asistida por cofactores).
• La mutación L28F desplaza el flujo hacia la vía intrínseca, afectando las tasas de liberación del producto.

Conclusiones:

• La dinámica de las proteínas es crítica para el ciclo catalítico del DHFR y la liberación del producto.
• Dos vías distintas rigen la disociación del producto, influenciadas por la presencia de cofactores y la conformación de las proteínas.
• La mutación L28F proporciona información sobre cómo la dinámica alterada puede modular la actividad enzimática a través de la repartición de la vía.