La unión específica de la orientación de las rupturas de ADN iniciadas por AID promueve el cambio de clase de...

Área de la Ciencia:

• Inmunología
• Biología molecular
• La genética

Sus antecedentes:

• El desarrollo de las células B implica que la endonucleasa RAG rompa los segmentos de genes de la inmunoglobulina de cadena pesada (IgH) para el ensamblaje de exones V(D) J.
• La recombinación con interruptor de clase (CSR) en células B maduras reemplaza el exón de la región constante Cμ con exones de la región constante aguas abajo (CHs).
• La RSC es iniciada por la desaminasa citidina inducida por activación (AID) y requiere la unión de roturas de doble cadena de ADN (DSB) en una orientación de deleción.

Objetivo del estudio:

• Determinar si la unión específica de orientación es una característica programada de la CSR, similar a la recombinación V ((D)) J.
• Investigar el mecanismo por el cual la RSE logra una orientación productiva hacia la eliminación.
• Identificar los factores implicados en el cumplimiento de la orientación de la RSE.

Principales métodos:

• Adaptación de la secuenciación de translocación de alto rendimiento en todo el genoma a un ensayo de unión de extremo de DSB sensible.
• Aplicación del ensayo a las BDS endógenas de la región S iniciadas por AID en células B de ratón.

Principales resultados:

• La RSE está programada para ocurrir en una orientación de eliminación productiva.
• Un mecanismo sin precedentes que involucra características organizativas de cis IgH y DSB de la región S iniciadas por AID facilita esta orientación.
• Los factores de respuesta DSB dependientes de ATM y 53BP1 están implicados en la aplicación de este mecanismo.

Conclusiones:

• La orientación hacia la RSE es una característica mecanicista programada, no aleatoria.
• El estudio aclara un nuevo mecanismo para lograr una orientación productiva de la RSE.
• Comprender estos mecanismos proporciona información sobre la diversificación de la clase de anticuerpos de las células B y las vías de reparación del ADN.