Ensamblaje quimioenzimático de glicoconjugados bacterianos para el etiquetado ortogonal específico del sitio

Área de la Ciencia:

• Microbiología
• Glicobiología
• Biología Química

Sus antecedentes:

• Los glucoconjugados de la superficie celular bacteriana son cruciales para las interacciones huésped-patógeno.
• La comprensión de estas interacciones requiere gliconjugados químicamente definidos y modificables.
• Campylobacter jejuni posee una vía compleja de glicosilación de proteínas ligadas a N (Pgl).

Objetivo del estudio:

• Evaluar la tolerancia de las enzimas de la vía Pgl de Campylobacter jejuni a los sustratos azidados de azúcares UDP.
• Desarrollar métodos quimioenzimáticos para la preparación de glicanos y glicopéptidos funcionalizados con azida.
• Crear herramientas para investigar el papel de los glucoconjugados de C. jejuni en la colonización del huésped.

Principales métodos:

• Síntesis quimioenzimática de sustratos de azido modificado con UDP.
• Ensayos enzimáticos in vitro con las enzimas de la vía de Campylobacter jejuni Pgl.
• Preparación de glicanos y glicopéptidos ligados al difosfato de undecaprenol con incorporación de azido específico del sitio.

Principales resultados:

• Las enzimas de Campylobacter jejuni Pgl toleran los sustratos azidados de azúcar UDP.
• Los enfoques quimioenzimáticos permiten la introducción de azidos específicos del sitio en los glicanos heptasacáridos.
• Se sintetizaron con éxito glicanos y glicopéptidos ligados al difosfato de undecaprenol con funcionalidad azida.

Conclusiones:

• Los glucoconjugados modificados por azida pueden sintetizarse utilizando enzimas de glicosilación de Campylobacter jejuni.
• Estos glucoconjugados modificados sirven como herramientas valiosas para estudiar las interacciones bacterianas.
• Los métodos desarrollados facilitan el etiquetado ortogonal para sondear las funciones biológicas.