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Clonado molecular y caracterización de un transportador de glucosa regulable por insulina
D E James1, M Strube, M Mueckler
1Department of Cell Biology, Washington University Medical School, St. Louis, Missouri 63110.
Nature
|March 2, 1989
Resumen
Los investigadores identificaron un nuevo transportador de glucosa en los adipocitos y el tejido cardíaco de ratas. Este transportador es crucial para la absorción de glucosa estimulada por insulina en las células musculares y grasas, mejorando el metabolismo de la glucosa.
Área de la Ciencia:
- Biología Molecular Biología Molecular
- Fisiología Celular Fisiología celular
- La bioquímica es la bioquímica.
Sus antecedentes:
- La insulina estimula la absorción de glucosa en el músculo y la grasa a través de la translocación del transportador de glucosa.
- Estudios anteriores sugirieron un distinto transportador de glucosa regulable por insulina debido a las diferencias de reactividad cruzada de anticuerpos.
- Un anticuerpo monoclonal (mAb 1F8) identificó una proteína de masa molecular única de 43.000 en adipocitos de rata.
Objetivo del estudio:
- Clonar y secuenciar el ADNc que codifica el transportador de glucosa regulable por insulina reconocido por mAb 1F8.8.
- Caracterizar la distribución tisular y las propiedades de este nuevo transportador de glucosa.
Principales métodos:
- Producción y uso de un anticuerpo monoclonal específico (mAb 1F8).
- La inmunoprecipitación y el etiquetado de fotoafinidad con citocalasina B.
- Clonado y secuenciación de ADNc de las bibliotecas de adipocitos y de corazón de ratas.
- Estudios de hibridación de ARNm para determinar la distribución en los tejidos.
Principales resultados:
- ADNc aislado y secuenciado que codifica una proteína 43K reconocida por mAb 1F8.8.
- El nuevo transportador de glucosa comparte una identidad de secuencia del 65% con el transportador de glucosa HepG2 humano.
- El mRNA de este transportador se encuentra predominantemente en el músculo esquelético, el corazón y el tejido adiposo.
- La exposición a la insulina aumentó la concentración de esta proteína en las membranas plasmáticas de los adipocitos.
Conclusiones:
- El ADNc clonado codifica una proteína de membrana con características del transportador de glucosa translocable en los tejidos sensibles a la insulina.
- Este transportador juega un papel importante en el transporte de glucosa mediado por insulina en el músculo y la grasa.
- Los hallazgos proporcionan evidencia molecular de un transportador de glucosa regulable por insulina distinto.