Inactivación de todo el genoma de los retrovirus endógenos porcinos (PERV)

Área de la Ciencia:

• La genética
• Virología
• Ciencias del trasplante

Sus antecedentes:

• El trasplante de órganos se enfrenta a una escasez crítica de órganos de donantes.
• Los órganos porcinos son una solución potencial, pero los retrovirus endógenos porcinos (PERV) plantean una preocupación significativa de seguridad para el xenotransplante.
• Los PERV pueden transmitirse potencialmente de cerdos a humanos, lo que requiere su inactivación.

Objetivo del estudio:

• Erradicar todos los retrovirus endógenos porcinos (PERV) en una línea celular epitelial de riñón porcino (PK15).
• Evaluar la eficacia de CRISPR-Cas9 en la interrupción de las copias múltiples de PERV.
• Evaluar la reducción de la transmisión del PERV a las células humanas tras la modificación genética.

Principales métodos:

• Determina el número de copias de PERV en las células PK15 (62 copias).
• Se empleó la edición del gen CRISPR-Cas9 para interrumpir el polgen PERV en todas las copias identificadas.
• Culturas conjuntas de células PK15 modificadas con células humanas para cuantificar la transmisión de PERV.

Principales resultados:

• Interrumpido con éxito todas las 62 copias del gen pol PERV en la línea celular PK15.
• Se logró una reducción de más de 1000 veces en la transmisión de PERV a las células humanas utilizando las células modificadas.
• Se ha demostrado una alta multiplexabilidad de CRISPR-Cas9, dirigida a hasta 62 copias de genes.

Conclusiones:

• CRISPR-Cas9 es una herramienta poderosa para inactivar los PERV en las células porcinas.
• La erradicación exitosa de los PERV en las células PK15 reduce significativamente el riesgo de transmisión viral entre especies.
• Este estudio apoya la aplicación clínica potencial de los órganos porcinos inactivados por PERV para el xenotransplante humano.