La estructura de un complejo HOIP / E2 ~ ubiquitina revela el mecanismo y la regulación de la ligasa RBR E3

Área de la Ciencia:

• La bioquímica
• Biología molecular
• Biología estructural

Sus antecedentes:

• La ubiquitinación regula la señalización y la función celular.
• Las ligasas de ubiquitina E3 median la transferencia de ubiquitina, y las ligasas de tipo RING E3 suelen actuar directamente.
• Las ligasas E3 RING-between-RING (RBR), incluida la HOIP, se desvían al formar un intermediario covalente, similar a las ligasas de tipo HECT.

Objetivo del estudio:

• Determinar la estructura de la ligasa HOIP RBR E3 humana completamente activa en complejo con un conjugado de E2~ubiquitina.
• Para aclarar el mecanismo de acción de las ligasas RBR E3.

Principales métodos:

• Cristalografía de rayos X para obtener la estructura de la ligasa HOIP RBR E3 activa.
• Ensayos bioquímicos para estudiar los mecanismos de transferencia de la ubiquitina.

Principales resultados:

• Se determinó la primera estructura de una ligasa HOIP RBR E3 humana intacta y completamente activa en complejo con un conjugado de E2~ubiquitina.
• El HOIP RBR activo adopta una conformación distinta, uniendo E2~ubiquitina de una manera alargada, alineando los centros catalíticos para la transferencia de ubiquitina.
• Tres motivos de doble hélice IBR en HOIP RBR se unen a la ubiquitina activada y a una molécula de ubiquitina reguladora adicional, revelando un mecanismo similar al HECT.

Conclusiones:

• La estructura proporciona información crítica sobre el ciclo catalítico de la ligasa RBR E3.
• Los hallazgos sugieren un mecanismo general para las ligasas RBR E3, distinto de las ligasas de tipo RING conocidas anteriormente.
• Este trabajo aclara el mecanismo previamente desconocido de las ligasas RBR E3.