La disección genética de los factores huésped de Flaviviridae a través de pantallas CRISPR a escala genómica

Área de la Ciencia:

• Virología
• Biología molecular
• La genética

Sus antecedentes:

• Los virus Flaviviridae, incluidos el virus del dengue (DENV) y el virus de la hepatitis C (HCV), causan cargas sanitarias globales significativas con opciones de tratamiento limitadas.
• Comprender las interacciones huésped-patógeno es crucial para desarrollar terapias antivirales efectivas contra estas amenazas virales emergentes y persistentes.

Objetivo del estudio:

• Identificar exhaustivamente los factores del huésped esenciales para la replicación del DENV y el VHC utilizando un enfoque de detección genética CRISPR combinado.
• Aclarar las funciones específicas de los factores huésped identificados en los mecanismos de replicación viral.
• Explorar las posibles divergencias y convergencias en las dependencias del huésped entre el DENV y el VHC.

Principales métodos:

• Utilizó una estrategia de detección genética conjunta CRISPR para interrumpir sistemáticamente los genes del huésped y evaluar su impacto en la replicación de DENV y HCV.
• Se realizaron estudios mecanicistas para identificar las etapas del ciclo de vida viral dependientes de los factores identificados del huésped.
• Interacciones investigadas entre las proteínas virales y los complejos del huésped.

Principales resultados:

• Se han identificado complejos proteicos asociados al retículo endoplasmático (ER), incluido el complejo oligosacariltransferasa (OST), como críticos para la replicación de DENV, en particular la replicación del ARN viral.
• Se ha demostrado que la deficiencia del complejo OST anula la replicación de DENV y que las proteínas virales interactúan con el OST.
• Se descubrieron distintos factores de hospedaje para el VHC, incluidos los receptores virales, las proteínas de unión al ARN, las enzimas metabólicas y un vínculo inesperado con los niveles de dinucleótido de adenina flavina (FAD).

Conclusiones:

• Los requisitos del factor huésped para el DENV y el HCV presentan divergencias significativas, lo que pone de relieve las vulnerabilidades específicas del virus.
• El complejo OST es un factor huésped crucial para el DENV y otros flavivirus transmitidos por mosquitos, que representan un objetivo antiviral potencial.
• Los factores de dependencia del huésped identificados proporcionan nuevos objetivos para el desarrollo de terapias antivirales contra las infecciones por Flaviviridae.