Una sonda fluorogénica bioortogonal de infrarrojo cercano para la detección de ARNm

Área de la Ciencia:

• La bioquímica
• Biología molecular
• Biología Química

Sus antecedentes:

• El desarrollo de métodos para la visualización y detección de ARN es crucial.
• La química bioortogonal ofrece una vía prometedora para las imágenes de ácido nucleico.
• Las reacciones anteriores con tetrazina fueron limitadas en la diversidad de fluorógenos.

Objetivo del estudio:

• Para reportar una nueva reacción de desenjaulado de tetrazina bioortogonal.
• Para ampliar el rango de fluorógenos activados por las reacciones de tetrazina.
• Para permitir la detección selectiva de ARN en las células vivas.

Principales métodos:

• Utilizamos la reactividad de la tetrazina para desenmascarar los fluoróforos enjaulados con éter vinílico.
• Los fluoróforos conjugados y los socios de tetrazina a las sondas de ácido nucleico antisenso.
• Se detectaron secuencias de ARN objetivo en células vivas utilizando sondas emisoras de infrarrojo cercano.

Principales resultados:

• Se ha demostrado una nueva reacción de liberación de tetrazina para la activación de fluoróforos.
• Se ha logrado una reactividad fluorogénica altamente selectiva de las sondas tras el recocido del ARN objetivo.
• Se detectaron con éxito secuencias de ARNm en células vivas utilizando fluorógenos NIR.

Conclusiones:

• La reacción desarrollada expande la química fluorogénica de la tetrazina a los tintes NIR.
• Las reacciones de tetrazina inducidas por la proximidad ofrecen una amplia utilidad para la imagen de biomoléculas endógenas.
• Este enfoque tiene potencial para visualizar ácidos nucleicos en células y tejidos.