m(6) La metilación del ARN promueve la represión transcripcional mediada por el XIST

Área de la Ciencia:

• La epigenética
• Biología del ARN
• Regulación genética

Sus antecedentes:

• El ARN largo no codificante XIST (transcripción específica X-inactiva) es crucial para la inactivación del cromosoma X y el silenciamiento de genes.
• La N6-metiladenosina (m6A) es una modificación prevalente del ARN, pero su papel en los ARN largos no codificantes (ARNlnc) sigue siendo en gran medida inexplorado.

Objetivo del estudio:

• Investigar el papel y el mecanismo de la modificación m6A en el silenciamiento transcripcional mediado por XIST.
• Identificar las proteínas implicadas en la formación y el reconocimiento de m6A en XIST.

Principales métodos:

• La inmunoprecipitación de ARN seguida de secuenciación (RIP-seq) para mapear los sitios m6A en el XIST.
• Experimentos de desactivación utilizando siRNA para evaluar la función de RBM15, RBM15B, METTL3 y YTHDC1.
• Ensayos de unión al ARN y experimentos de rescate funcional utilizando el enlace artificial de YTHDC1.

Principales resultados:

• XIST está extensamente metilado con al menos 78 residuos de m6A en las células humanas.
• La proteína 15 del motivo de unión al ARN (RBM15) y RBM15B median la formación de m6A en el XIST y en los ARNm celulares mediante el reclutamiento del complejo de la metiltransferasa m6A.
• La eliminación de RBM15, RBM15B o METTL3 altera el silenciamiento del gen mediado por XIST.
• YTHDC1 se une preferentemente a los residuos de m6A en XIST y es esencial para su función.
• El atado artificial de YTHDC1 a XIST rescata el silenciamiento en ausencia de m6A.

Conclusiones:

• Una nueva vía que involucra la formación de m6A por RBM15/RBM15B y el reconocimiento por YTHDC1 es esencial para la represión transcripcional mediada por XIST.
• Este estudio aclara la importancia funcional de la modificación m6A en la regulación del lncRNA y el silenciamiento genético.