Perfilado proteómico químico de las metiltransferasas humanas

Área de la Ciencia:

• La bioquímica
• Biología Química
• Proteomía

Sus antecedentes:

• La metilación es un proceso biológico crítico mediado por metiltransferasas (MTs) dependientes de la S-adenosil metionina (SAM).
• La actividad MT desregulada está relacionada con enfermedades como el cáncer, sin embargo, muchas MT humanas permanecen sin caracterizar.
• Se necesitan herramientas avanzadas para estudiar los MT y sus inhibidores en los sistemas biológicos.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar y aplicar nuevas sondas fotorreactivas de S-adenosil homocisteína (SAH) para la caracterización de la metiltransferasa.
• Perfilar y enriquecer una amplia gama de MT humanas a partir de lisados celulares utilizando proteomía química.
• Utilizar estas sondas para el cribado y la evaluación de la selectividad de los inhibidores de MT.

Principales métodos:

• Síntesis de las sondas fotorreactivas de S-adenosil homocisteína (SAH).
• Aplicación de las sondas SAH en experimentos proteómicos químicos.
• Enriquecimiento y perfilado de las metiltransferasas a partir de lisatos de células cancerosas humanas.
• Detección de inhibidores de la metiltransferasa y evaluación de su selectividad.

Principales resultados:

• Perfilado y enriquecido con éxito más de 50 metiltransferasas humanas de alta especificidad.
• Demostró la capacidad de las sondas SAH para enriquecer las proteínas asociadas a la MT.
• Se identificó un nuevo inhibidor covalente de la nicotinamida N-metiltransferasa (NNMT), una enzima relevante para el cáncer y los trastornos metabólicos.

Conclusiones:

• Las sondas SAH desarrolladas y los métodos de proteómica química son valiosos para la caracterización funcional de las MT.
• Estas herramientas facilitan el estudio de los complejos de MT y el descubrimiento de inhibidores selectivos de MT.
• Los hallazgos contribuyen a la comprensión de las MT en la biología y las enfermedades de los mamíferos, particularmente en el cáncer.