A potencia el empalme alternativo del pre-ARNm Sxl para una determinación robusta del sexo de Drosophila

Área de la Ciencia:

• Biología molecular
• La epigenética
• Biología del ARN

Sus antecedentes:

• La N-metiladenosina (m6A) es la modificación interna más frecuente en el ARN mensajero eucariota (ARNm), reconocida por las proteínas del dominio YTH.
• El complejo del metilosoma m6A, que incluye METTL3 y WTAP, se conserva en todas las especies, con homólogos de Drosophila como Ime4 y Fl(2) d.
• El papel de m6A en las regiones intrónicas y su función precisa en la regulación del empalme alternativo, particularmente en la determinación del sexo, seguía siendo en gran medida desconocida.

Objetivo del estudio:

• Investigar la función de m6A en Drosophila, específicamente su papel en el empalme alternativo y la determinación del sexo.
• Para aclarar el mecanismo por el cual m6A influye en el empalme del gen Sex letal (Sxl).
• Identificar la proteína lectora m6A responsable de decodificar las señales m6A en el pre-ARNm Sxl.

Principales métodos:

• Generación y análisis de mutantes de Drosophila Ime4-null.
• Ensayos de determinación del sexo y análisis fenotípico de mutantes.
• Secuenciación de ARN y análisis de empalme alternativo.
• Investigación de la función de la proteína lectora m6A YT521-B.

Principales resultados:

• Las Drosophila que carecen de Ime4 (mutantes Ime4-nulo) son viables pero muestran una determinación de sexo sesgada por el macho y no pueden volar.
• m6A es esencial para el empalme alternativo específico de Sxl, crucial para el desarrollo femenino.
• m6A también reprime traslacionalmente el letal masculino específico 2 (msl-2) en las hembras, impidiendo la compensación de la dosis.
• La proteína lectora de m6A YT521-B se une directamente a m6A en el intrón Sxl y su ausencia fenocopias mutantes Ime4.
• La pérdida de m6A afecta el empalme alternativo en otros genes, particularmente en las UTR de 5', y afecta globalmente la expresión génica metabólica.

Conclusiones:

• La modificación m6A es indispensable para el empalme alternativo específico de Sxl y la determinación del sexo en Drosophila.
• La proteína lectora de m6A YT521-B juega un papel crítico en la mediación de la regulación de empalme dependiente de m6A.
• Este estudio revela m6A como un mecanismo antiguo y específico para regular la expresión génica a través del empalme alternativo, particularmente en el contexto de la determinación del sexo.