La enzima SAM radical B12 PoyC cataliza la metilación de la valina C durante la biosíntesis de la politeonamida

Área de la Ciencia:

• La bioquímica
• Biología molecular
• Síntesis de productos naturales

Sus antecedentes:

• Los péptidos sintetizados ribosomalmente y modificados post-traducionalmente (RiPP) son una clase diversa de productos naturales con aplicaciones farmacéuticas.
• La politeonamida A es un RiPP que presenta modificaciones post-traduccionales únicas, incluidas las metilaciones C.
• Se propusieron dos enzimas radicales de S-adenosilmetionina (rSAM), PoyB y PoyC, para catalizar estas metilaciones C.

Objetivo del estudio:

• Investigar la actividad in vitro de la supuesta enzima rSAM PoyC.
• Para determinar si PoyC cataliza la metilación del péptido Cβ.
• Para aclarar el mecanismo de las enzimas rSAM dependientes de B12 en la biosíntesis de RiPP.

Principales métodos:

• Ensayos enzimáticos in vitro con PoyC.
• Análisis de los productos de reacción, incluida la S-adenosilhomocisteína y la 5'-deoxyadenosina.
• Caracterización del cofactor B12 (MeCbl) dentro de la enzima.

Principales resultados:

• PoyC fue confirmado como la primera enzima rSAM dependiente de B12 que cataliza la metilación del péptido Cβ.
• La enzima transfiere un grupo metilo de la S-adenosilmetionina a un residuo de l-valina.
• Se identificó un cofactor metilcobalamina (MeCbl) fuertemente unido, que transfiere el grupo metilo durante la catálisis.

Conclusiones:

• La actividad de PoyC proporciona nuevos conocimientos sobre la biosíntesis de la politeonamida.
• Este estudio revela el papel crucial de las enzimas B12-rSAM en la modificación de los péptidos ribosómicos.
• Los hallazgos amplían el repertorio conocido de enzimas dependientes de B12 y sus mecanismos catalíticos.