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MicroRNAs01:22

MicroRNAs

21.2K
MicroRNA (miRNA) are short, regulatory RNA transcribed from introns—non-coding regions of a gene—or intergenic regions—stretches of DNA present between genes. Several processing steps are required to form biologically active, mature miRNA. The initial transcript, called primary miRNA (pri-mRNA), base-pairs with itself forming a stem-loop structure. Within the nucleus, an endonuclease enzyme, called Drosha, shortens the stem-loop structure into hairpin-shaped pre-miRNA. After...
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DNA Microarrays02:34

DNA Microarrays

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Microarrays are high-throughput and relatively inexpensive assays that can be automated to analyze large quantities of data at a time. They are used in genome-wide studies to compare gene or protein expression under two varied conditions, such as healthy and diseased states. Microarrays consist of glass or silica slides on which probe molecules are covalently attached through surface functionalization. Most commonly, the slides are prepared through the chemisorption of silanes to silica...
16.9K
RNA-seq03:21

RNA-seq

9.4K
RNA sequencing, or RNA-Seq, is a high-throughput sequencing technology used to study the transcriptome of a cell. Transcriptomics helps to interpret the functional elements of a genome and identify the molecular constituents of an organism. Additionally, it also helps in understanding the development of an organism and the occurrence of diseases. 
Before the discovery of RNA-seq, microarray-based methods and Sanger sequencing were used for transcriptome analysis. However, while...
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Estrategia de multiplexación basada en nanosondas codificada optokinéticamente para el perfil de microARN

Sungi Kim1, Jeong-Eun Park1, Woosung Hwang1

  • 1Department of Chemistry, Seoul National University , Seoul 08826, South Korea.

Journal of the American Chemical Society
|February 10, 2017
PubMed
Resumen

Este estudio introduce una nueva estrategia de detección molecular multiplejada utilizando nanosondas codificadas optocinéticamente para el perfil cuantitativo de microARN simultáneo. El ensayo permite la detección rápida y específica de múltiples objetivos de microARN, lo que ayuda en el diagnóstico del cáncer.

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Área de la Ciencia:

  • Biotecnología
  • Nanotecnología
  • Biología molecular

Sus antecedentes:

  • El análisis multiplexado de moléculas que interactúan es crucial para comprender los sistemas biológicos, especialmente para el perfil de microARN (miRNA) en biología celular, biosensores y diagnósticos de cáncer.
  • El diagnóstico preciso del cáncer requiere la detección altamente específica de múltiples secuencias de miRNA simultáneamente.

Objetivo del estudio:

  • Desarrollar una estrategia de detección molecular multiplejada para un perfilado confiable y cuantitativo de múltiples objetivos de microARN.
  • Demostrar la capacidad del ensayo desarrollado para su aplicación potencial en el diagnóstico del cáncer.

Principales métodos:

  • Utilizó nanosondas codificadas optocinéticamente (OK) con señales ópticas distintas (rojo, verde, azul) atadas a una bicapa lipídica soportada (SLB).
  • Se utiliza microscopía de campo oscuro (DFM) para el monitoreo in situ de una sola partícula y el análisis normalizado de RGB de conjuntos NP combinatorios.
  • Desarrolló el ensayo OK-nanoprobe-lipid bilayer (OK-NLB) para diferenciar y cuantificar múltiples objetivos de miRNA.

Principales resultados:

  • El ensayo OK-NLB diferenció y cuantificó con éxito 9 objetivos diferentes de miRNA en una sola muestra.
  • Se logró la detección simultánea de múltiples dianas de miARN con alta cuantificación y especificidad en 1 hora.
  • Se validó el ensayo utilizando experimentos de desajuste de una sola base y ARN total extraído de células HeLa, mostrando resultados comparables a la reacción en cadena de la polimerasa de transcripción inversa cuantitativa (qRT-PCR).

Conclusiones:

  • El ensayo basado en OK-NP proporciona una herramienta poderosa para la detección molecular multiplejada con alta sensibilidad y especificidad.
  • Este ensayo tiene un potencial significativo para avanzar en el diagnóstico basado en miRNA, particularmente para la detección temprana del cáncer.