La ingeniería del ADN ribosómico en un cromosoma sintético megabase

Área de la Ciencia:

• Biología sintética
• La genómica
• Genética de la levadura

Sus antecedentes:

• La construcción de cromosomas sintéticos a gran escala es un desafío significativo en la biología sintética.
• Comprender la función y la estabilidad del cromosoma es crucial para la ingeniería del genoma.

Objetivo del estudio:

• Para diseñar y sintetizar un cromosoma lineal de 976.067 pares de bases, synXII, en *Saccharomyces cerevisiae*.
• Investigar métodos para ensamblar y validar cromosomas sintéticos.
• Para diseñar un cromosoma sintético para la identificación de especies alteradas.

Principales métodos:

• Se empleó un método de ensamblaje en dos pasos que incluía la integración de megapartes y el ensamblaje mediado por recombinación meiótica.
• Los defectos de crecimiento fueron analizados y rescatados mediante la introducción de genes de ARNt ectópicos.
• El ADN ribosomal (ADNr) fue modificado y reintroducido en lugares específicos.

Principales resultados:

• Se sintetizó y integró con éxito un cromosoma sintético funcional XII (synXII) en *S. cerevisiae*.
• Se rescataron defectos menores de crecimiento asociados con deleciones de genes de ARNt.
• Las secuencias de ADNr diseñadas permitieron que la cepa sintética fuera identificada erróneamente como *Saccharomyces bayanus* utilizando código de barras de ADN.

Conclusiones:

• La síntesis exitosa y la validación funcional de synXII demuestran la viabilidad de la ingeniería cromosómica a gran escala.
• Este trabajo proporciona una base para construir genomas sintéticos más complejos.
• La modificación de las secuencias de ADNr ofrece un nuevo enfoque para la identificación de cepas y la manipulación genética.