GAL4 activa la expresión génica en las células de mamíferos

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Reglamento genético Reglamento genético.
• Genética de la levadura Genética de la levadura

Sus antecedentes:

• GAL4 es un activador de la transcripción bien caracterizado en la levadura.
• El promotor del virus del tumor mamario del ratón (MMTV) es un reportero común en los estudios de expresión génica.
• Comprender la función del factor de transcripción entre especies proporciona información sobre los mecanismos reguladores conservados.

Objetivo del estudio:

• Investigar si el factor de transcripción de la levadura GAL4 puede activar la transcripción en células de mamíferos.
• Para determinar los dominios funcionales de GAL4 requeridos para la activación en un sistema de mamíferos.
• Examinar el efecto sinérgico de GAL4 y el receptor glucocorticoide en el promotor de MMTV.

Principales métodos:

• Transfección de células de mamíferos con plásmidos que contienen la secuencia de unión al ADN GAL4 y el gen reportero.
• Análisis de la expresión génica del reportero.
• Uso de mutantes de deleción de GAL4 y un mutante con deficiencia de unión al ADN.
• Co-transfección con el vector de expresión del receptor glucocorticoide.

Principales resultados:

• GAL4 activa el promotor MMTV en las células de los mamíferos.
• La activación requiere una secuencia de unión GAL4 aguas arriba del promotor.
• Las regiones activadoras específicas de GAL4 se conservan para su función en las células de mamíferos.
• Un derivado de GAL4 que se une al ADN pero no puede activarse en la levadura tampoco se activa en las células de los mamíferos.
• GAL4 y el receptor de glucocorticoides exhiben una activación sinérgica del promotor MMTV.

Conclusiones:

• El factor de transcripción GAL4 puede funcionar en las células de mamíferos, lo que indica principios reguladores conservados.
• Los dominios específicos dentro de GAL4 son esenciales para su activación transcripcional entre especies.
• GAL4 y el receptor glucocorticoide pueden cooperar para mejorar la expresión génica.