Videos de Experimentos Relacionados
Similaridad de secuencia de la fosfolipasa C con la región no catalítica del src
M L Stahl1, C R Ferenz, K L Kelleher
1Department of Molecular Biology, Genetics Institute Inc., Cambridge, Massachusetts 02142.
Nature
|March 17, 1988
Resumen
Los investigadores clonaron una enzima cerebral bovina, PLC-148, que muestra actividad de la fosfolipasa C dependiente del calcio. Esta enzima tiene similitudes de secuencia con las tirosinacinasas y el gen transformador de crk.
Área de la Ciencia:
- Biología Molecular Biología Molecular
- La bioquímica es la bioquímica.
- Genética La genética.
Sus antecedentes:
- Las enzimas fosfolipasa C (PLC) específicas del fosfatidilinositol median la producción de los segundos mensajeros diacilglicerol e inositol 1,4,5-trisfosfato.
- Las enzimas PLC activadas son cruciales en las vías de señalización celular.
Objetivo del estudio:
- Clonar y caracterizar una nueva enzima cerebral bovina con actividad de fosfolipasa C.
- Para investigar la expresión y la base genética de esta enzima.
Principales métodos:
- La clonación de ADN complementario (ADNc) a partir del cerebro bovino.
- Expresión de la enzima clonada en células de mamíferos para evaluar la actividad.
- Análisis de transcripción de ARN mensajero (ARNm) en células bovinas y humanas.
- Análisis de la mancha del sur del genoma bovino.
Principales resultados:
- Se clonó un ADNc del cerebro bovino que codificaba el PLC-148, mostrando una actividad del PLC dependiente del calcio y específica del fosfatidilinositol al momento de la expresión.
- Se identificó una transcripción de 7,5 kilobases en el ARNm del cerebro bovino, con una transcripción similar encontrada en algunas líneas celulares humanas.
- El análisis del Southern blot sugiere que uno o dos genes en el genoma bovino se hibridan con el ADNc del PLC-148.
- Se observó una similitud de secuencia significativa entre PLC-148 y las tirosinacinasas no receptoras, así como el gen transformador del virus del sarcoma aviar CT10 crk.
Conclusiones:
- La enzima clonada PLC-148 representa una nueva fosfolipasa C. específica para el fosfatidilinositol y dependiente del calcio.
- La homología de la secuencia de la enzima sugiere roles potenciales en las vías de señalización que involucran a las tirosinacinasas y los oncogenes virales.
- La presencia de transcripciones relacionadas en células humanas indica una potencial conservación evolutiva y una relevancia biológica más amplia.