La proteína activadora de la guanosina trifosfatasa (GAP) interactúa con el dominio de unión del efector p21 ras

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• La señalización celular.
• La oncogénesis es la oncogénesis.

Sus antecedentes:

• Una proteína del citoplasma, la proteína activadora de la GTPasa (GAP), mejora la actividad de la guanosina trifosfatasa (GTPasa) de la proteína N-ras.
• GAP no afecta la actividad de los mutantes ras oncogénicos.
• El GAP es omnipresente en los eucariotas superiores e interactúa con las proteínas H-ras y N-ras.

Objetivo del estudio:

• Para identificar la región específica de ras p21 que interactúa con GAP.
• Para determinar la importancia funcional de la interacción GAP para la actividad ras p21.

Principales métodos:

• Purificación de 21 proteínas mutantes H-ras.
• Prueba de la capacidad de las proteínas mutantes para someterse a la estimulación de la GTPasa por GAP.
• Utilizando un anticuerpo contra el dominio carboxilo-terminal de ras p21.

Principales resultados:

• Las mutaciones en regiones no esenciales, el dominio carboxilo-terminal (residuos 165-185) y la región de unión a purinas (residuos 117 y 119) no afectaron la respuesta GAP.
• Las mutaciones transformadoras en las posiciones 12, 59 y 61 abolieron la estimulación de la GTPasa por GAP.
• Las mutaciones en la región del efector putativo (aminoácidos 35, 36 y 38) fueron insensibles al GAP, pero una mutación en la posición 39 no alteró la interacción GAP-p21.

Conclusiones:

• La interacción GAP es esencial para la actividad biológica ras p21.
• GAP puede funcionar como una proteína efector ras.
• Las mutaciones específicas en ras p21, particularmente en la región de unión al fosforilo, interrumpen la interacción y la función de GAP.