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Imágenes vibratorias de súper múltiple

Lu Wei1, Zhixing Chen1, Lixue Shi1

  • 1Department of Chemistry, Columbia University, New York, New York 10027, USA.

Nature
|April 21, 2017
PubMed
Resumen
Este resumen es generado por máquina.

Los investigadores desarrollaron un nuevo método de imagen óptica súper múltiple utilizando dispersión Raman estimulada. Esta técnica permite la visualización de alta sensibilidad y alta selectividad de 24 especies moleculares distintas en células vivas, avanzando en la investigación biológica.

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Área de la Ciencia:

  • La biofísica
  • Imágenes moleculares
  • Biología celular

Sus antecedentes:

  • Las técnicas actuales de imagen molecular enfrentan limitaciones para visualizar simultáneamente numerosas especies moleculares distintas dentro de las células debido a la superposición espectral y problemas de sensibilidad.
  • La microscopia de fluorescencia está limitada por una "barrera de color", que limita el número de señales distinguibles, mientras que la microscopia Raman espontánea sufre de una intensidad de señal débil.
  • Los métodos existentes luchan por lograr una alta selectividad y sensibilidad para obtener imágenes de múltiples objetivos moleculares cuantitativamente dentro de los sistemas biológicos vivos.

Objetivo del estudio:

  • Desarrollar un nuevo enfoque de imagen óptica capaz de visualizar un gran número de especies moleculares distintas dentro de las células vivas con alta selectividad y sensibilidad.
  • Para superar las limitaciones de las técnicas de microscopía existentes, en particular la "barrera del color" en la fluorescencia y la baja señal en la microscopía Raman espontánea.
  • Establecer una capacidad de imagen súper múltiple para el análisis detallado de la heterogeneidad celular y tisular.

Principales métodos:

  • Se utilizó la microscopía de dispersión Raman estimulada (SRS) en condiciones de pre-resonancia electrónica para mejorar la detección de señales.
  • Desarrolló una paleta de tintes infrarrojos conjugados de triple enlace, cada uno exhibiendo un solo pico en la ventana espectral Raman silenciosa de la célula.
  • Combinó la nueva paleta de tintes con las sondas fluorescentes existentes para lograr 24 colores de resolución para imágenes súper múltiples.

Principales resultados:

  • Lograr imágenes altamente selectivas y sensibles de moléculas objetivo en células vivas, con una sensibilidad de hasta 250 nanomolares y una constante de tiempo de 1 milisegundo.
  • Demostró una capacidad de imagen súper múltiple de 24 colores al combinar nuevos tintes Raman con sondas fluorescentes.
  • Se han visualizado con éxito heterogeneidades dependientes del tipo celular en el ADN y el metabolismo de las proteínas en coculturas neuronales y tejidos cerebrales.

Conclusiones:

  • El enfoque de imagen óptica súper múltiple basado en dispersión Raman estimulada desarrollado ofrece una capacidad sin precedentes para visualizar múltiples especies moleculares en sistemas biológicos vivos.
  • Esta técnica supera las limitaciones espectrales y de sensibilidad anteriores, lo que permite una visión más profunda de los procesos celulares complejos y la heterogeneidad de los tejidos.
  • La plataforma de imágenes de 24 colores tiene un potencial significativo para avanzar en nuestra comprensión de las interacciones intrincadas en fisiología y patología.