Las células madre pluripotentes humanas recurrentemente adquieren y expanden mutaciones negativas dominantes de P53

Área de la Ciencia:

• Biología de las células madre
• La genética
• Investigación sobre el cáncer

Sus antecedentes:

• Las células madre pluripotentes humanas (células hPS) son vitales para la medicina regenerativa debido a su capacidad de autorrenovación.
• Las células hPS cultivadas pueden acumular mutaciones genéticas, incluidas las variantes de número de copias, lo que podría afectar su seguridad.
• El espectro de mutaciones adquiridas más allá de las variantes del número de copias en las células hPS sigue siendo en gran medida desconocido.

Objetivo del estudio:

• Investigar la naturaleza y los efectos funcionales de las mutaciones adquiridas de la secuencia del genoma en las líneas de células madre embrionarias humanas (hES) cultivadas.
• Identificar las mutaciones asociadas al cáncer en las líneas celulares hPS, en particular las destinadas a aplicaciones clínicas.
• Evaluar la prevalencia y la ventaja selectiva de las mutaciones de TP53 en las células hPS.

Principales métodos:

• Secuenciación del exoma de 140 líneas celulares hES independientes.
• Análisis computacional para detectar mutaciones de mosaico dentro de las líneas celulares.
• Minería de datos publicados de secuenciación de ARN de 117 líneas celulares hPS.
• Análisis de las fracciones alélicas de la mutación TP53 y su correlación con el número de pasajes.

Principales resultados:

• Se identificaron seis mutaciones de TP53 en cinco líneas celulares hES no relacionadas, todas codificando variantes dominantes negativas comunes en los cánceres humanos.
• La fracción alélica mutante de TP53 aumentó con el número de pasajes, lo que indica una ventaja de crecimiento selectivo.
• Se encontraron nueve mutaciones adicionales de TP53 en otras líneas celulares de hPS, que afectan el dominio de unión al ADN de P53.
• Se observó pérdida de heterocigosidad en el locus TP53 en tres líneas, lo que mejora aún más la ventaja selectiva.

Conclusiones:

• Las células hPS cultivadas pueden adquirir y expandir mutaciones TP53 asociadas al cáncer en condiciones de cultivo estándar.
• Estas mutaciones pueden conferir una ventaja selectiva, pasando potencialmente desapercibida.
• La caracterización genética rigurosa de las células hPS y sus derivados es esencial antes de la aplicación clínica para garantizar la seguridad del paciente.