Caracterización funcional del locus de riesgo de enfermedad arterial coronaria

Área de la Ciencia:

• La genética
• Biología cardiovascular
• Biología molecular

Sus antecedentes:

• Un locus cromosómico específico (4q32.1) está fuertemente relacionado con el riesgo de enfermedad arterial coronaria (CAD).
• Este locus contiene GUCY1A3, que codifica una enzima clave en la vía del óxido nítrico/cGMP.

Objetivo del estudio:

• Aclarar el mecanismo por el cual las variantes comunes en 4q32.1 influyen en el riesgo de EAC.
• Investigar el papel de la regulación de GUCY1A3 por factores de transcripción.

Principales métodos:

• La PCR cuantitativa y el inmunobloting para el análisis de la expresión génica y proteica.
• Validación in silico y experimental de la unión del factor de transcripción (ZEB1) a las regiones reguladoras de GUCY1A3.
• Ensayos de genes reporteros, knockdown mediado por siRNA y experimentos de sobreexpresión.
• Ensayos funcionales que incluyen la migración vascular de las células del músculo liso y la agregación plaquetaria.

Principales resultados:

• La variante de riesgo de CAD (rs7692387) se asoció con niveles más bajos de ARNm GUCY1A3 y actividad promotora.
• El factor de transcripción ZEB1 se une preferentemente al alelo no de riesgo, mejorando la expresión de GUCY1A3.
• Los portadores de alelos no de riesgo mostraron una mejora de la función plaquetaria y una reducción de la migración de las células musculares lisas vasculares tras la estimulación.
• Una mayor expresión de GUCY1A3 se correlacionó con una reducción de la aterosclerosis en un modelo de ratón.

Conclusiones:

• La variante rs7692387 modula la actividad del promotor GUCY1A3 a través de la unión diferencial a ZEB1.
• El aumento de la expresión de GUCY1A3, impulsado por la unión de ZEB1 al alelo no de riesgo, conduce a niveles y actividad más altos de guanilil ciclasa soluble (sGC).
• El aumento de la expresión de sGC está relacionado con un menor riesgo de aterosclerosis tanto en estudios en humanos como en ratones.