Descubrimiento de un inhibidor de la cinasa covalente a partir de una biblioteca de moléculas pequeñas codificada en...

Área de la Ciencia:

• La bioquímica
• Biología Química
• Descubrimiento de drogas

Sus antecedentes:

• La determinación de la interacción utilizando proteínas no purificadas (IDUP) es un método para identificar pares de ligandos: objetivos codificados en ADN de mezclas biológicas complejas.
• Trabajos anteriores establecieron la utilidad de IDUP con moléculas pequeñas vinculadas al ADN y objetivos de proteínas no purificadas en lisatos celulares.

Objetivo del estudio:

• Aplicar el IDUP al cribado a gran escala de las bibliotecas de compuestos bioactivos codificados por ADN contra las quinasas humanas etiquetadas por ADN.
• Identificar nuevas moléculas pequeñas: interacciones con proteínas y posibles fármacos candidatos.

Principales métodos:

• Se utilizó un experimento de biblioteca × biblioteca de fase de solución que combinaba compuestos bioactivos codificados por ADN y quinasas humanas etiquetadas por ADN.
• Se utilizó el método IDUP para amplificar selectivamente las secuencias de ADN correspondientes a los pares de unión ligando:proteína.
• Se analizaron 32.096 combinaciones posibles para identificar las interacciones.

Principales resultados:

• Recapituló con éxito las interacciones conocidas entre pequeñas moléculas y proteínas, validando el enfoque experimental.
• Se ha identificado el ácido ethacrino como un nuevo ligando e inhibidor de la MAP2K6 quinasa.
• Se determinó que el ácido ethacrino inhibe MAP2K6 a través de la alquilación de un residuo de cisteína no conservado.

Conclusiones:

• El método IDUP está validado por su capacidad para descubrir ligandos para proteínas de relevancia biomédica significativa.
• El ácido ethacrino representa una nueva clase de inhibidores de MAP2K6 con potenciales aplicaciones terapéuticas.
• El IDUP facilita el cribado de alto rendimiento para el descubrimiento de fármacos y la identificación de objetivos.