Detección selectiva de la actividad de la enzima de metilación de histonas a través de un ensayo en tándem...

Área de la Ciencia:

• La bioquímica
• Biología molecular
• Biología Química

Sus antecedentes:

• Las modificaciones postraslacionales (PTM) son cruciales para regular la función de las proteínas.
• Las lisinometiltransferasas (por ejemplo, PRDM9) y las demetilasas (por ejemplo, JMJD2E) juegan un papel clave en la regulación epigenética.
• El monitoreo preciso de los PTM es esencial para comprender los procesos celulares y las enfermedades.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un sistema de seguimiento in situ selectivo para los PTM.
• Investigar la actividad de la lisina metiltransferasa PRDM9 y la lisina demetilasa JMJD2E.
• Para permitir el estudio de la reactividad cruzada de las enzimas y la interferencia de los péptidos no sustratos.

Principales métodos:

• Acoplamiento de cavitandos profundos dispuestos a un ensayo de tándem supramolecular basado en la fluorescencia.
• Utilizando el sistema de sensores para el monitoreo en tiempo real de las modificaciones enzimáticas.
• El uso de un sistema con tres componentes cavitandos para detectar sustratos enzimáticos específicos.

Principales resultados:

• Se ha conseguido un seguimiento in situ selectivo de los PTM.
• Se han detectado con éxito sustratos específicos de PRDM9 y JMJD2E en mezclas complejas de péptidos.
• Se ha demostrado la capacidad de investigar la reactividad cruzada y la interferencia peptídica.

Conclusiones:

• El sistema de sensores desarrollado proporciona una herramienta poderosa para el estudio de los PTM.
• Este método permite un análisis preciso de la especificidad y la actividad de la enzima.
• Facilita una comprensión más profunda de la regulación epigenética por PRDM9 y JMJD2E.