Modulación alostérica del reclutamiento de Grb2 a la proteína de andamio intrínsecamente desordenada, LAT, por...

Área de la Ciencia:

• Señales celulares
• Biología molecular
• Inmunología

Sus antecedentes:

• La transducción de la señal intracelular se basa en la fosforilación de la tirosina de los receptores y las proteínas del andamio.
• El ligador para la activación de las células T (LAT) la fosforilación y el reclutamiento de Grb2 son cruciales en la activación temprana del receptor de células T (TCR).
• Los múltiples sitios de fosforilación de LAT sugieren funciones reguladoras complejas.

Objetivo del estudio:

• Analizar cuantitativamente el impacto de la fosforilación multivalente del LAT en la señalización de la TCR.
• Para aclarar los mecanismos alostéricos que rigen las interacciones LAT:Grb2.
• Comprender cómo la localización de la membrana afecta la unión LAT: Grb2 y la transmisión de la señal.

Principales métodos:

• Reconstitución de las reacciones iniciales de la vía de señalización TCR en las membranas soportadas.
• Análisis de las construcciones de LAT con mutaciones combinatorias de residuos de tirosina.
• Monitoreo de la fosforilación de LAT utilizando Grb2 como reportero y la cinasa ZAP-70.

Principales resultados:

• Se descubrió un nuevo mecanismo alostérico en el que la fosforilación remota de tirosina afecta la afinidad de unión de LAT: Grb2.
• La unión LAT:Grb2 está modulada por la localización de la membrana, afectando principalmente la velocidad de activación cinética.
• La fosforilación de LAT por ZAP-70 en las membranas exhibe una catálisis procesativa débil.

Conclusiones:

• La fosforilación multivalente de LAT actúa como una puerta, que requiere múltiples eventos para una transmisión de señal eficiente.
• La fosforilación altera el conjunto conformacional de LAT, regulando la accesibilidad de Grb2.
• Esta regulación alostérica es crítica para controlar la propagación de la señal en las células T.