Dicer utiliza módulos distintos para el reconocimiento de los terminales de dsRNA

Área de la Ciencia:

• Biología molecular
• Virología
• Biología estructural

Sus antecedentes:

• Los invertebrados utilizan enzimas Dicer para procesar el ARN viral de doble cadena (dsRNA).
• Drosophila Dicer-2 exhibe discriminación de sustratos basada en los terminales de dsRNA, lo que influye en los patrones de escisión (procesivos frente a distributivos).
• Anteriormente se pensaba que los dominios Plataforma-PAZ eran los únicos sitios de unión de terminales de dsRNA en Dicer.

Objetivo del estudio:

• Para aclarar la base estructural de la discriminación de Drosophila Dicer-2 entre los terminales de dsRNA.
• Investigar el papel de diferentes dominios de Dicer en la unión y escisión de sustratos de ARNd.
• Para descubrir nuevos mecanismos en las vías de defensa antiviral.

Principales métodos:

• Para determinar las estructuras de alta resolución se empleó la criomicroscopia electrónica (Cryo-EM).
• Se resolvieron las estructuras de Drosophila Dicer-2 solo y en complejo con dsRNA contundente.
• Se utilizaron ensayos bioquímicos para evaluar el desenrollamiento dependiente del trifosfato de adenosina (ATP).

Principales resultados:

• El dominio helicasa, no implicado previamente en la unión térmica, es esencial para la unión del dsRNA contundente.
• El dsRNA contundente se desenrolla localmente y se enrosca a través del dominio de la helicasa de una manera dependiente del ATP.
• Los terminales de 3 'sobresalientes del dsRNA no activan el dominio de la helicasa para la unión.

Conclusiones:

• Se ha descubierto un nuevo mecanismo que involucra el dominio helicasa en el reconocimiento y procesamiento de los terminales de dsRNA por parte de Dicer-2.
• Este hallazgo revela una nueva capa de regulación en la inmunidad innata antiviral.
• El estudio abre caminos para explorar las funciones dependientes de la helicasa en otros ortólogos Dicer y enzimas relacionadas.