El gen estructural de S. cerevisiae para la citina sintasa no es necesario para la síntesis de citina in vivo

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Genética de la levadura Genética de la levadura

Sus antecedentes:

• La citina sintasa es un zimógeno ligado a la membrana plasmática en Saccharomyces cerevisiae.
• La citina sintasa activada sintetiza citina insoluble, similar a la que se encuentra en las cicatrices de los brotes.

Objetivo del estudio:

• Clonar y caracterizar el gen CHS1 que codifica la citina sintasa.
• Confirmar CHS1 como el gen estructural de la quitina sintasa utilizando levadura de fisión.

Principales métodos:

• Aislamiento de mutantes con deficiencia de citina sintasa (chs1).
• Clonado del gen CHS1.
• Expresión de una proteína de fusión CHS1-lacZ en S. pombe.
• Experimentos de alteración genética CHSI.

Principales resultados:

• El gen CHS1 tiene un marco de lectura abierto de 3400 bases, que codifica una proteína de 130 kd.
• La expresión de CHS1-lacZ en S. pombe confería actividad de la citina sintetasa, confirmando el papel de CHS1.
• Las alteraciones del gen CHSI resultaron en la pérdida de la actividad de la citina sintetasa in vitro, pero mantuvieron la viabilidad y los niveles normales de citina in vivo.

Conclusiones:

• CHS1 es el gen estructural para la citina sintasa en S. cerevisiae.
• La alteración de CHS1 afecta la actividad de la citina sintetasa, pero no la viabilidad celular o las funciones esenciales.