Video Experimental Relacionado
Updated: Aug 19, 2026
07:25
Use of Stopped-Flow Fluorescence and Labeled Nucleotides to Analyze the ATP Turnover Cycle of Kinesins
Published on: October 17, 2014
Correlación entre la ATPasa y las actividades de translocación de microtúbulos de la quinesinasa del huevo de erizo
Nature
|July 9, 1987
Resumen
La quinesina de huevo de erizo de mar exhibe actividad de ATPasa activada por microtúbulos, lo que sugiere que su motilidad está acoplada a la hidrólisis de ATP. Este hallazgo apoya el mecanismo de puente cruzado para el movimiento de microtúbulos impulsado por la quinesina.
Área de la Ciencia:
- Biología celular Biología celular.
- Los motores moleculares son los motores moleculares de las moléculas.
- La bioquímica es la bioquímica.
Sus antecedentes:
- Los motores basados en microtúbulos como la diineína y la quinesina son cruciales para el transporte intracelular y la división celular.
- Se sabe que la hidrólisis de ATP de Dynein impulsa el deslizamiento de los microtúbulos a través de un mecanismo de puente cruzado.
- La unión sensible al nucleótido de la kinesin y la translocación de los microtúbulos sugieren un mecanismo similar, pero el acoplamiento directo de la hidrólisis de ATP a la motilidad no se demostró.
Objetivo del estudio:
- Para investigar la relación entre la hidrólisis de ATP y la motilidad en el huevo de erizo de mar kinesin.
- Para determinar si la actividad de la ATPasa de la quinesina está activada por los microtúbulos y acoplada a su función motora.
Principales métodos:
- La quinesina de huevo de erizo de mar purificada se preparó con o sin una etapa de unión de microtúbulos de 5'-adenililimidodifosfato (AMPPNP).
- La actividad de la ATPasa activada por microtúbulos se midió utilizando Mg-ATP como sustrato.
- Se evaluaron los efectos de varios inhibidores (ATP libre de Mg, EDTA, Na3VO4, AMPPNP) tanto en la actividad de la ATPasa como en la translocación de microtúbulos.
Principales resultados:
- La quinesina del huevo de erizo de mar demostró una actividad significativa de la Mg2+-ATPasa activada por microtúbulos.
- Esta actividad de la ATPasa fue inhibida dependiendo de la dosis por el ATP libre de Mg, EDTA, Na3VO4 y AMPPNP.
- Los mismos reactivos que inhibían la actividad de la ATPasa también inhibían la translocación de microtúbulos por kinesin.
Conclusiones:
- La translocación de microtúbulos impulsada por la quinesina está acoplada a su actividad de Mg2+-ATPasa activada por microtúbulos.
- Esto apoya un mecanismo de puente cruzado para la motilidad de la quinesina, análogo a la miosina.
- Los hallazgos proporcionan evidencia directa del mecanismo de transducción de energía en el transporte basado en kinesin.
Videos de Conceptos Relacionados
01:45Destabilization of Microtubules
The destabilization of microtubules can occur during different stages of the microtubule lifecycle, such as nucleation or elongation. It can take place at either end of the microtubule or in the microtubule lattices as a whole. The lifespan of individual microtubules within a cell varies according to the cell type and stage of the cell cycle. During interphase, the lifespan of the microtubule is about 30 minutes, while during cell division, it is about 15 minutes. In axonal microtubules of...
01:32Microtubule Associated Motor Proteins
Eukaryotic cells have different motor proteins for transporting various cargo within the cell. These motor proteins differ based on the filament they associate with, the direction they move within the cell, and the type of cargo they transport. Motor proteins that associate with microtubules are known as microtubule-associated motor proteins. There are two families of microtubule-associated motor proteins —Kinesins and Dyneins. Both these proteins assist in the transport of cellular cargos...
01:43The Movement of Organelles and Vesicles
In eukaryotic cells, cytoskeletal filaments such as actin, microtubules, and intermediate filaments form a mesh-like cytoskeletal network. These filaments serve as tracks for transporting cellular cargo. Specialized motor proteins use the chemical energy stored in adenosine triphosphate (ATP) for this transport. During interphase, microtubules are polarized, with the plus-end towards the cell periphery and the minus-end towards the cell center. Two microtubule-associated motor proteins,...
01:24Microtubules in Cell Motility
Microtubules are thick hollow cylindrical proteins that help form the cytoskeleton. Microtubules have varied roles in the cell. These filaments help form cellular appendages like cilia and flagella, which are responsible for locomotion. The cilia arise from basal bodies, separated from the main body by a membrane-like structure forming the transition zone. This zone is the gate for the entry of lipids and proteins, creating a unique composition of lipids and proteins in the ciliary membrane and...
02:11Forces Acting on Chromosomes
During mitosis, chromosome movements occur through the interplay of multiple piconewton level forces. In prometaphase, these forces help in chromosome assembly or congression at the equatorial plane, eventually leading to their alignment at the metaphase plate. The forces acting on the chromosomes are space and time-dependent; therefore, they vary with the position of the chromosomes as the cell progresses through mitosis.
Microtubules and motor proteins exert two types of forces on...
Microtubules and motor proteins exert two types of forces on...
01:39Anaphase A and B
Microtubules form through the end-to-end polymerization of tubulin heterodimers. Kinetochore microtubules originate from the spindle poles, and their plus-ends connect with the kinetochores on sister-chromatids. Ndc80 protein complexes, present on the kinetochore, form low-affinity links with the plus end of these kinetochore microtubules.
Plus-end depolymerization releases tubulin heterodimers from the terminal region of the microtubule. As tubulin subunits are lost, the Ndc80 complexes detach...
Plus-end depolymerization releases tubulin heterodimers from the terminal region of the microtubule. As tubulin subunits are lost, the Ndc80 complexes detach...