Se requiere potencial de membrana para la función de MurJ

Área de la Ciencia:

• Microbiología
• La bioquímica
• Descubrimiento de drogas

Sus antecedentes:

• MurJ es una flipasa bacteriana esencial para la exportación de Lípido II, un componente clave de la pared celular.
• El desarrollo de nuevos antibióticos contra las bacterias Gram-negativas es una necesidad médica crítica no satisfecha.
• Los métodos existentes para cuantificar la actividad de MurJ son limitados debido a la falta de alteración química del sustrato durante el transporte.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un ensayo cuantitativo para el seguimiento de la actividad de la flipasa MurJ.
• Para identificar las condiciones y compuestos que inhiben la función de MurJ.
• Comprender los cambios conformacionales de MurJ en respuesta a la inhibición.

Principales métodos:

• Se empleó una estrategia de etiquetado de biotina para cuantificar la acumulación intracelular de lípido II como medida de la inhibición de MurJ.
• El ensayo se utilizó para probar el efecto del potencial de membrana en la actividad de MurJ.
• Se realizaron pruebas de accesibilidad a la cisteína para analizar la conformación de MurJ.

Principales resultados:

• Un nuevo ensayo cuantificó con éxito la inhibición de MurJ mediante la medición de la acumulación intracelular de lípidos II.
• La actividad de MurJ fue inhibida por compuestos que disipan el potencial de la membrana.
• La inhibición bajo la disipación del potencial de membrana llevó a MurJ a adoptar una conformación inactiva y orientada hacia el exterior.

Conclusiones:

• El potencial de membrana es esencial para la función de MurJ en E. coli.
• El ensayo desarrollado permite la cuantificación de los inhibidores MurJ.
• La conformación inactiva y orientada hacia el exterior de MurJ proporciona un objetivo estructural para el diseño de nuevos antibióticos.