Los factores celulares combinan la recombinación con la fase de crecimiento: caracterización de un nuevo componente...

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Genética La genética.
• Microbiología Microbiología.

Sus antecedentes:

• La recombinación específica del sitio lambda es un proceso crítico en la biología lambda de los bacteriófagos.
• Los roles de los factores del huésped en la modulación de la recombinación de fagos no se comprenden completamente.

Objetivo del estudio:

• Para caracterizar la función de una nueva proteína huésped, Factor for Inversion Stimulation (FIS), en la recombinación específica del sitio lambda.
• Para aclarar el mecanismo por el cual el FIS influye en la excisión lambda y la integración.

Principales métodos:

• Ensayos bioquímicos in vitro para evaluar la unión de FIS y la estimulación de la recombinación.
• Análisis de las interacciones de unión al ADN entre los sitios FIS, Xis y lambda attP.
• Estudios in vivo que examinan la ocupación del sitio de unión de FIS en relación con el crecimiento celular.

Principales resultados:

• FIS se une al sitio lambda attP, superponiéndose a las regiones de unión de Xis, y puede unirse cooperativamente con Xis.
• FIS estimula la escisión de lambda hasta 20 veces in vitro, en particular con las concentraciones subóptimas de Xis.
• FIS no afecta a la recombinación integrativa y no puede mediar la escisión independientemente de Xis.
• La unión de FIS a su sitio in vivo depende de la fase de crecimiento celular, estando completamente ocupada en la fase exponencial y vacante en la fase estacionaria.

Conclusiones:

• FIS es un factor anfitrión regulador que modula la escisión de lambda cooperando con Xis.
• La actividad de FIS depende de la concentración de Xis y no influye en la recombinación integrativa.
• Los niveles celulares de FIS o la accesibilidad regulan dinámicamente las vías de recombinación lambda in vivo.