Repetición terminal larga del virus de la leucemia bovina: un promotor específico del tipo de célula

Área de la Ciencia:

• Virología Virología.
• Biología Molecular Biología Molecular
• Regulación genética Reglamento genético.

Sus antecedentes:

• El virus de la leucemia bovina (VLB) es un retrovirus oncogénico.
• La repetición terminal larga (LTR) contiene elementos reguladores que controlan la expresión génica viral.
• Comprender la función de BLV LTR es clave para descifrar la patogénesis viral.

Objetivo del estudio:

• Para investigar la actividad funcional del promotor BLV LTR.
• Para identificar las secuencias reguladoras dentro de la BLV LTR que influyen en la expresión génica.
• Para determinar la especificidad de tipo celular del BLV LTR.

Principales métodos:

• Transfección de varias líneas celulares con plásmidos recombinantes que contienen el BLV LTR vinculado al gen de la cloramfenicol acetiltransferasa (CAT).
• Monitoreo de la expresión transitoria de la actividad CAT como una medida de la función del promotor LTR.
• Mutagénesis dirigida al sitio para eliminar regiones específicas dentro del BLV LTR.

Principales resultados:

• La expresión CAT impulsada por BLV LTR se observó exclusivamente en líneas celulares productoras de BLV establecidas (células de pulmón de FLK y murciélago).
• La eliminación de secuencias 100-170 nucleótidos aguas arriba del sitio de inicio del ARN redujo la actividad del CAT en aproximadamente diez veces.
• La eliminación de secuencias de 50 pares de bases aguas abajo hasta el extremo 3 'del LTR disminuyó la actividad CAT en un 87%.

Conclusiones:

• El BLV LTR exhibe una inusual actividad promotora específica del tipo de célula.
• Ambas regiones 5' y 3' en relación con el sitio de inicio del ARN son críticas para la expresión génica mediada por BLV LTR.
• Estos hallazgos ponen de relieve los complejos mecanismos regulatorios del BLV LTR.