Inmovilización sin rastro de analíticos para experimentos de alto rendimiento con espectrometría de masas SAMDI

Área de la Ciencia:

• Química analítica
• La bioquímica
• Química orgánica

Sus antecedentes:

• Los ensayos de espectrometría de masas sin etiqueta facilitan el análisis de la reacción de alto rendimiento.
• Los métodos actuales a menudo requieren grupos funcionales para la inmovilización del reactivo / producto, lo que potencialmente altera la actividad molecular.
• Existe la necesidad de técnicas de inmovilización sin rastro en ensayos basados en la superficie.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un método sin rastro para unir covalentemente diversas moléculas a monocapas autoensambladas (SAM).
• Permitir el análisis de espectrometría de masas en superficie sin modificar las propiedades intrínsecas de las moléculas de interés.
• Demostrar la utilidad de este método para la caracterización de las enzimas y el seguimiento de las reacciones químicas.

Principales métodos:

• Funcionalización de SAMs con un grupo 3-trifluoromethyl-3-phenyl-diazirine.
• Generación fotolítica de un intermediario de carbeno por irradiación UV.
• Inserción covalente del carbeno en varios enlaces moleculares para la inmovilización.
• Análisis de aductos inmovilizados mediante espectrometría de masas por desorción/ionización láser asistida por superficie (SAMDI).

Principales resultados:

• La inmovilización covalente exitosa de las moléculas en los SAM funcionales.
• Detección de aductos inmovilizados mediante espectrometría de masas SAMDI.
• Aplicación del método para caracterizar una enzima que metaboliza el fármaco P450.
• Monitoreo de una reacción de acoplamiento Suzuki-Miyaura utilizando la técnica desarrollada.

Conclusiones:

• El método de inmovilización sin rastro desarrollado es eficaz para la espectrometría de masas basada en la superficie.
• Este enfoque preserva la actividad nativa de las moléculas, crucial para los estudios bioquímicos y químicos.
• El método tiene un potencial significativo para la detección de alto rendimiento, el descubrimiento de reacciones y la optimización en varios campos científicos.