El óxido nítrico modula la actividad redox de la endonucleasa III por un desplazamiento negativo de 800 mV en la...

Área de la Ciencia:

• Bioquímica y Biología Molecular
• Química bioorgánica
• La electroquímica

Sus antecedentes:

• La endonucleasa III (EndoIII) es una enzima de reparación del ADN que contiene un grupo [Fe4S4].
• Los grupos de hierro- azufre en las proteínas son susceptibles a la modificación por el óxido nítrico (NO).
• Las consecuencias funcionales de la nitrosilación de clúster [Fe4S4] en las enzimas de reparación del ADN no se comprenden bien.

Objetivo del estudio:

• Caracterizar los productos de nitrociliación del grupo [Fe4S4] en EndoIII.
• Investigar el impacto de la nitrosilación en la actividad redox y la función de reparación del ADN de EndoIII.
• Para aclarar el mecanismo por el cual la nitrosilación afecta el transporte de carga mediado por el ADN.

Principales métodos:

• La electroquímica del oro modificado por el ADN y la voltametría de la película proteica.
• Ensayos electroforéticos de movilidad por turnos (EMSA).
• Espectrometría de masas (EM) de proteínas enteras y digeridas con tripsina.
• Espectroscopia de resonancia paramagnética de electrones de pulso de correlación hiperfina (HYSCORE).

Principales resultados:

• La nitrosilación de EndoIII produce un complejo de hierro dinitrosil y un éster rojo de Roussin no reportado.
• El EndoIII nitrolizado exhibe un desplazamiento negativo significativo en el potencial de reducción (~ -800 mV).
• La actividad redox ligada al ADN de EndoIII se elimina con la nitrosilación, a pesar de una afinidad similar para la unión al ADN.

Conclusiones:

• La nitrosilación en racimo de la endonucleasa III [Fe4S4] produce distintas especies de hierro-nitrosilo.
• La nitrosilación en racimo altera drásticamente las propiedades redox de EndoIII.
• La nitrosilación del racimo [Fe4S4] modula la actividad redox unida al ADN y el transporte de carga mediado por el ADN.