BODIPYs fotoactivables de color rojo lejano para imágenes de superresolución de células vivas

Área de la Ciencia:

• Biología Química
• La biofísica
• Imágenes ópticas

Sus antecedentes:

• Los tintes de borondipirrometeno (BODIPY) son fluoróforos ampliamente utilizados.
• Las sondas fluorescentes existentes a menudo sufren de foto blanqueamiento y brillo limitado.
• Lograr imágenes de alta resolución en células vivas sigue siendo un desafío.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar nuevos fluoróforos fotoactivados para imágenes de células vivas.
• Para lograr la detección de una sola molécula y imágenes de super-resolución de los orgánulos celulares.
• Para superar las limitaciones de la microscopía de fluorescencia convencional.

Principales métodos:

• Diseño y síntesis de los conjugados fotoactivados de oxazina y BODIPY.
• La activación fotoquímica de la fluorescencia de color rojo lejano.
• Microscopía de localización de una sola molécula (SMLM) en células vivas.
• Inmovilización covalente de los fluoróforos dentro de los orgánulos celulares.

Principales resultados:

• La desconexión fotoinducida de la fracción de oxazina activa la fluorescencia de color rojo lejano brillante de BODIPY.
• Los fluoróforos están localizados dentro de los compartimentos lisosómicos y covalentemente inmovilizados.
• La supresión de la difusión permite la reconstrucción iterativa de imágenes de súper resolución.
• Visualización de orgánulos etiquetados con alta resolución espacial y precisión de localización.

Conclusiones:

• Los nuevos fluoróforos BODIPY fotoactivados permiten imágenes de una sola molécula sin precedentes en células vivas.
• Las sondas diseñadas superan las limitaciones de difusión para la microscopía de súper resolución.
• Este enfoque mejora significativamente la resolución espacial más allá de las capacidades de imágenes de fluorescencia convencionales.