Aislamiento del gen que codifica el factor de transcripción del choque térmico de S. cerevisiae

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Genética de la levadura Genética de la levadura
• Investigación de los factores de transcripción.

Sus antecedentes:

• Los factores de transcripción del choque térmico (HSF) son reguladores críticos de las respuestas al estrés celular.
• Comprender la estructura y función de HSF1 es clave para descifrar la regulación génica bajo estrés.

Objetivo del estudio:

• Para aislar y caracterizar el gen del factor de transcripción del choque térmico de la levadura (HSF1).
• Para identificar el dominio de unión al ADN de la proteína HSF1.

Principales métodos:

• Cribado de la biblioteca genómica utilizando lambda gt11.11.
• Secuenciación del ADN y determinación de la masa de las proteínas.
• Expresión funcional en E. coli y levadura.
• Análisis del sur y experimentos de alteración genética.

Principales resultados:

• El gen HSF1 fue aislado y secuenciado con éxito, codificando una proteína de 833 aminoácidos.
• La proteína expresada mostró una actividad específica de unión y transcripción del ADN, confirmando la identidad genética.
• HSF1 es un gen esencial de una sola copia en la levadura.
• El dominio de unión al ADN fue mapeado a una región de 118 aminoácidos.

Conclusiones:

• El gen HSF1 de la levadura ha sido clonado y caracterizado.
• El dominio de unión al ADN de HSF1 no se ajusta a los motivos estructurales conocidos de unión al ADN.
• HSF1 es un gen esencial para la viabilidad de la levadura.